为什么要二次灭菌？污染了吗？还是你以为没有灭过的，又灭了一次？

如果是污染了，再灭菌以后，虽然是无菌了，但是杂菌利用了培养基的营养，对你的后续培养是很不利的。不过有点时候还是可以长出菌来的。

有的培养基能 有的不能 就看你的培养基了
你做的能 那就叫能 你做的不能 就说明你的培养基不能

是师妹说只到105度，就没升上去，然后我又重新灭了一次，后来想可能她灭菌的时候，可能正在105度往下降，可能是二次了
到目前，该细菌还没怎么长，而且培养基的颜色比平时要深
以前灭完后，降到 100度以下立即取出的

二次灭菌的LB颜色肯定会深一些，
因为酵母提取物里面含有磷酸盐，
磷酸盐经高温后容易变成褐色。
过度灭菌还容易引起沉淀产生，
特别是在含磷酸盐的培养基中。
此外，灭菌还会造成培养基pH值降低，
一般灭菌一次会降低0.2左右，
有的时候会降得更多。
过度灭菌造成培养基酸化，
不利于细菌的培养，

lb培养基一次用不完凝了之后用微波炉融化后一样用、
所以2次灭菌最起码对lb没有影响

已证明确实二次灭菌了，
菌长的不好 或没有长，十二个小时了，觉得培养基的浊度还不够，平时应该比较高了
所以我们重新做了