转化时为什么出现两种菌落,一种长得很快(很少),一种很慢,但密密麻麻的!
最近我在做构建文库的实验,可是转化了几次,都出现这样的情况:
板中有些菌落长得很快,但是很少,零散分布在板中
等到上面的那些菌落长得差不多的时候,慢慢又出现了无法计数的小的菌落,这些菌落很小,而且非常密集,特别还有就是集中于板中的某一块,我猜测也许是铺板时候出现的一些问题,那么如何避免呢?
另外,我把那些小菌落划具有抗性的板,明显看出具有抗性
请高手帮我解答一下,这是怎么回事呢?非常感谢!
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菌检结果怎么样?
可能你的连接有问题
小菌落做PCR检测一下,看看有没有插入片段。如果有,与大菌落的插入片段有没有区别?
我做过转化也是这样,不知道为什么啊?
我 也是在做构建文库的实验,也遇到你这种情况,有些菌落是在16个或20个小时以后长出的,基于蓝白斑筛选,这些菌落均是白色,而且长相很不错,但是师兄说这是污染掉的,不能进行挑选,提取质粒检测,确实没有插入片段,只是不知它是什么时候 怎么污染掉的,