20：80  甲醇：水  15min
95：5    甲醇：水  15min
80：20   甲醇：水  10min

然后就可以将色谱柱保存起来了。

第二次使用，直接用初始流动相平衡就可以了。

对于Ｃ１８柱:
20：80  甲醇：水  30min 流速：０．５ml/min
100    甲醇  15min 流速：０．５ml/min
对于正相柱：
异丙醇３０min 流速：０．５ml/min
甲醇１５min　流速：０．５ml/min
异丙醇１５min　流速：０．５ml/min
正已烷１５min　流速：０．５ml/min
对于离子交换柱：
８０：２０＝甲醇：水　３０min　流速：０．５ml/min
１００=水 20min 流速：０．５ml/min
然后就可以将色谱柱保存起来了,对于离子交换柱，如果长时间不用，则必须加入防腐剂或放入冰箱中保存．
第二次使用，直接用初始流动相平衡就可以了，

对于Ｃ１８柱反相
30：70  甲醇：水  30min 流速：０．５ml/min
纯乙醇  15min 流速：０．５ml/min

如果流动相有盐或酸的成分，先用30：70（甲醇：水）的比例冲洗30min，后用100%甲醇冲洗30min；如果是有机溶剂做流动相时，用70：30（甲醇：水）的比例冲洗30min，然后用100%甲醇冲洗30min。

对于C18反相色谱柱：先用甲醇-水（15：85）冲20~30min,流速0.8ml/min
                             再用100%甲醇冲20min,流速0.8ml/min
洗柱子时间不是绝对的，一般要结合柱压来看

我一般是先用纯水 30分钟的,然后
90:10 (WATER "MEOH)15MIN
70:30(W:M) 15
30:70(W:M)15
100(M)15
50:50(W:M)
最后关机子的.我的柱子是可以用纯水冲的,
做完样品一般用流动相多走20分钟!

反相柱，甲醇-纯水，1小时从1%→100%的甲醇，流速1ml/min，冲一个梯度，然后用纯甲醇，流速0.1ml/min冲一夜。