24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 2388  |  回复: 25

凯伦爱佳佳

金虫 (正式写手)

[求助] 荧光定量,ABI的机子、用的染料,扩增曲线和熔解曲线怎么成了这个样子 已有2人参与

前期摸索中,普通PCR温度梯度60℃。
模板试过稀释了5倍和10倍,20ul体系,95℃5min,95℃10s,60℃ 10s,72℃ 15s,40个循环。
荧光定量产物电泳条带为目的条带,使用过八连管,染料是罗氏的。

荧光定量,ABI的机子、用的染料,扩增曲线和熔解曲线怎么成了这个样子
P51212-170027.jpg


荧光定量,ABI的机子、用的染料,扩增曲线和熔解曲线怎么成了这个样子-1
P51212-171609.jpg


荧光定量,ABI的机子、用的染料,扩增曲线和熔解曲线怎么成了这个样子-2
P51212-171620.jpg


荧光定量,ABI的机子、用的染料,扩增曲线和熔解曲线怎么成了这个样子-3
P51214-121552.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

苯苯兔

银虫 (初入文坛)

也不太懂,求高手出来解答
2楼2015-12-15 09:02:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

凯伦爱佳佳

金虫 (正式写手)

别沉啊,求大神啊
3楼2015-12-15 10:26:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

凯伦爱佳佳

金虫 (正式写手)

管子问题?染料问题?体系问题?模板问题?操作问题?
4楼2015-12-15 10:31:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

GuanwenQ

新虫 (初入文坛)

5楼2015-12-15 10:40:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

GuanwenQ

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 凯伦爱佳佳 at 2015-12-15 10:31:03
管子问题?染料问题?体系问题?模板问题?操作问题?

你的引物是自己设计的还是买的

发自小木虫Android客户端
6楼2015-12-15 10:41:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

GuanwenQ

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
还有这个循环的时间似乎有点短,我自己做通常退火和延伸时间在30s~60s

发自小木虫Android客户端
7楼2015-12-15 10:50:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

凯伦爱佳佳

金虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by GuanwenQ at 2015-12-15 10:40:01
说一下点的样呗

10ul mix  ,7ul dd水  ,2ul cDNA ,各0.5引物
8楼2015-12-15 10:51:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

凯伦爱佳佳

金虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by GuanwenQ at 2015-12-15 10:50:24
还有这个循环的时间似乎有点短,我自己做通常退火和延伸时间在30s~60s

感觉这个时间,体现不出荧光定量机子相对于普通PCR的优越性。。。。原来用过罗氏480的,也是这个时间可以的。
9楼2015-12-15 10:53:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

凯伦爱佳佳

金虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by GuanwenQ at 2015-12-15 10:41:24
你的引物是自己设计的还是买的
...

自己设计的,然后跑温度梯度,筛选出来的
10楼2015-12-15 10:54:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 凯伦爱佳佳 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 提交了我也来说说感想 +8 fummck 2026-05-20 9/450 2026-05-21 11:41 by maxjing
[基金申请] 评审有感 +15 popular289 2026-05-18 26/1300 2026-05-21 10:35 by 西葫芦炒鸡蛋
[基金申请] 今年审到国自然15份,谈谈感受 +21 国自然国社科中 2026-05-17 22/1100 2026-05-21 09:37 by 2000zf36392
[基金申请] 河北省自然科学基金 +4 Peterchao 2026-05-18 4/200 2026-05-21 08:17 by articlefan
[论文投稿] 投MDPI的三个期刊都被桌拒 +3 木虫研究牲 2026-05-17 4/200 2026-05-21 08:02 by bobvan
[文学芳草园] 献血感触 +7 呀呀好傻 2026-05-19 12/600 2026-05-21 07:08 by maolC
[考博] 云南大学材料与能源学院解琳课题组钙钛矿博士招生 +4 光伏爱好者 2026-05-17 6/300 2026-05-21 01:37 by 17520222914
[有机交流] 反应很差,大量原料没有反应 5+3 Mr.Zot 2026-05-19 8/400 2026-05-20 22:19 by Equinoxhua
[基金申请] 国自然评分 +3 无名者登山 2026-05-20 4/200 2026-05-20 13:29 by vito刘
[考博] 如果工作了想读博,可以边工作边读全日制嘛? 30+3 铁达火车 2026-05-18 5/250 2026-05-20 09:33 by tfang
[有机交流] 如何实现卤原子转化 +3 BT20230424 2026-05-15 8/400 2026-05-20 09:32 by xtlilibin
[基金申请] 2026山东省优青 +3 luckinging 2026-05-14 4/200 2026-05-19 16:15 by 52wls
[考博] 找博士生导师 +6 小代想上岸 2026-05-15 7/350 2026-05-19 10:22 by free_fisher
[基金申请] 同样的基金本子,换个专家直接从C变A! (金币-10) +3 国自然国社科中 2026-05-19 3/150 2026-05-19 08:50 by Equinoxhua
[考博] 2026博士还有哪些学校有名额 +7 小王求读研 2026-05-15 8/400 2026-05-19 08:27 by zhyzzh
[基金申请] 国自然上会要求 +5 无名者登山 2026-05-18 9/450 2026-05-18 17:50 by BlakeReary
[硕博家园] 我在等一个没有答案的答案 +3 Love_MH 2026-05-17 3/150 2026-05-18 02:22 by 竹林孤影
[文学芳草园] 半夜喝咖啡 +3 myrtle 2026-05-15 5/250 2026-05-18 01:03 by 小沈2018
[考博] 光量子物理方向 博士招生 1人(2026.09) +3 sandyworld 2026-05-15 4/200 2026-05-17 14:38 by sandyworld
[硕博家园] 申请博士 +3 呃?呃 2026-05-15 3/150 2026-05-16 11:01 by a4742549
信息提示
请填处理意见