9楼: Originally posted by 凯伦爱佳佳 at 2015-12-15 10:53:35
感觉这个时间，体现不出荧光定量机子相对于普通PCR的优越性。。。。原来用过罗氏480的，也是这个时间可以的。...

11楼: Originally posted by GuanwenQ at 2015-12-15 11:03:28
熔解曲线的特异性很低，也就是扩增产物不单一，那么可能是引物设计的特异性不好，cycle没有跑好，还有就是cDNA降解，cycle的话要不然就是酶量问题，要不然就是cycle的周期扩增曲线不平滑，也就是有样品没有没有参与 ...

12楼: Originally posted by 文萱 at 2015-12-15 12:35:09
引物不特异

16楼: Originally posted by 文萱 at 2015-12-15 16:07:17
荧光定量引物跟普通pcr引物不一样的，跑的条件也不一样。荧光定量比普通pcr更灵敏，你初步试的时候就要在荧光定量pcr仪上试，你根据这次结果再调整下温度，时间等等，有的时候不是一次就好的，
...

18楼: Originally posted by GuanwenQ at 2015-12-15 16:11:15
如果电泳条带比较单一，那扩增产物可能是长度类似但是CG含量不单一的片段，那么这样看来或许是引物设计的特异性问题