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凯伦爱佳佳

金虫 (正式写手)

[求助] 荧光定量,ABI的机子、用的染料,扩增曲线和熔解曲线怎么成了这个样子 已有2人参与

前期摸索中,普通PCR温度梯度60℃。
模板试过稀释了5倍和10倍,20ul体系,95℃5min,95℃10s,60℃ 10s,72℃ 15s,40个循环。
荧光定量产物电泳条带为目的条带,使用过八连管,染料是罗氏的。

荧光定量,ABI的机子、用的染料,扩增曲线和熔解曲线怎么成了这个样子
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荧光定量,ABI的机子、用的染料,扩增曲线和熔解曲线怎么成了这个样子-1
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荧光定量,ABI的机子、用的染料,扩增曲线和熔解曲线怎么成了这个样子-3
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GuanwenQ

新虫 (初入文坛)

如果电泳条带比较单一,那扩增产物可能是长度类似但是CG含量不单一的片段,那么这样看来或许是引物设计的特异性问题

发自小木虫Android客户端
18楼2015-12-15 16:11:15
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苯苯兔

银虫 (初入文坛)

也不太懂,求高手出来解答
2楼2015-12-15 09:02:37
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凯伦爱佳佳

金虫 (正式写手)

别沉啊,求大神啊
3楼2015-12-15 10:26:47
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凯伦爱佳佳

金虫 (正式写手)

管子问题?染料问题?体系问题?模板问题?操作问题?
4楼2015-12-15 10:31:03
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