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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » RNA提取相关问题
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兜兜斑斑

新虫 (初入文坛)

[求助] RNA提取相关问题已有1人参与

用生工的Trizol提取小鼠脑组织总RNA，1,2孔为同一个样本，3，4孔为同一个样本，5，6孔为同一样本，加的都是1ml的Trizol，1/4的小脑。结果如图，最上面有一条带，这是由于DNA污染了吗？是否可以接着用Takala家的反转录试剂盒进行反转录后以此为模板做荧光定量PCR？如果不可以我该怎样避免这个问题？初学荧光，请高人指点，感激不尽！！！

RNA提取相关问题
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1楼2015-12-10 21:09:15
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许欧阳紫儿

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
兜兜斑斑: 金币+8, ★有帮助 2015-12-12 21:54:11
你加的marker是什么？

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2楼2015-12-10 23:06:48
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404991634

至尊木虫 (著名写手)
不能用此做，DNA会严重干扰荧光定量结果，建议重提

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无所畏惧
3楼2015-12-10 23:47:43
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兜兜斑斑

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 许欧阳紫儿 at 2015-12-10 23:06:48
你加的marker是什么？

加的是DNA2000的marker

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4楼2015-12-12 21:53:59
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兜兜斑斑

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 404991634 at 2015-12-10 23:47:43
不能用此做，DNA会严重干扰荧光定量结果，建议重提

重新提取好几次了，在氯仿离心后上清剩了好多，最大限度的避免取到中间层，但是还是有些许污染，还可能是其他操作上存在的问题么？

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5楼2015-12-12 21:57:50
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丝竹睛明

新虫 (小有名气)
有dna污染，有蛋白污染。上清少吸（不超过250），氯仿抽提两边。

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6楼2016-01-03 23:18:06
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wjxzqh

新虫 (初入文坛)
组织提还能用氯仿抽提两遍吗？还是第一次遇到

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7楼2016-09-07 18:42:57
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