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关于酵母RNA提取的问题:
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1.天根试剂单上面写着:“每5-10×10 5动物、植物或酵母细胞,或1×107细菌加入1 ml TROzlo试剂。”那么5-10×105酵母细胞是怎么计算的呢?网上有培养8个小时和培养2-4天然后取1ml菌液的两种说法,哪种得率会高点呢?2.破壁的时候我们实验室选择的是加玻璃珠,再涡旋震荡3分钟,因为试剂盒上没有明确加多少玻璃珠,涡旋振荡多少时间,每次我提的效果也不是很好,想请教下您以您的经验涡旋振荡多久为合适呢? 3. 所有离心管、枪头及相关溶液都必需无 RNA酶污染。耐高温器物可150℃烘烤4小时以除去RNA酶,其它器物除RNA酶可考虑用0.1%的DEPC水浸泡过夜,然后灭菌、烘干。但是量筒和容量瓶怎么办呢(量筒用来量取1乘TAE制胶,容量瓶是用来配置1乘TAE的)?有人说烘。。可是量筒和容量瓶是精密仪器,是不能烘的,烘了就不准了啊。。还有人说用酒精,可是酒精不能杀死RNA酶啊。。。 哪位大神解答一下。。谢谢 |
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