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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » RNA提取相关疑问！！！
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573009018

金虫 (初入文坛)

小硕在读

[交流] RNA提取相关疑问！！！

小弟第三次提RNA了，条带较模糊，似有拖带现象，三条带不明显，不明白哪里出了问题（可以确定的是操作可能比较慢），请有经验懂行的前辈指点！结果如图。

RNA提取相关疑问！！！
IMG_20150729_192334.jpg
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1楼 2015-07-29 20:34:46
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liulingjun15

金虫 (小有名气)
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-07-30 23:23:21
很明显降解了，操作上要注意，所有EP管，枪头都要无RNA酶
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5楼2015-07-30 18:47:42
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yufeiwaner

新虫 (小有名气)
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573009018: 金币+8 2015-07-31 16:50:29
哥们，你一次性做这么样品干嘛？？？样品越多，费的时间越多，RNA降解的可能性越大！还不如一次只提取4个样品。。。你从肝细胞里提取RNA么？另外你电泳得点marker啊
一般提取RNA，要求用刚拆不久的进口的EP管，吸头，国产货一般要DEPC水处理，麻烦。。。加了氯仿振荡要激烈，吸取上清时不能吸到沉淀。一般在实验桌上操作就可以了，不放心的话放超净台里操作，区别只是后者不用戴口罩。下次电泳记得点marker。提取到RNA后要赶紧反转或者超低温保存。
另外你用试剂盒还是RNAplus、Trizol提取的？
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7楼2015-07-31 10:12:44
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yufeiwaner

新虫 (小有名气)
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9楼: Originally posted by 573009018 at 2015-07-31 16:52:50
Trizol   不是加了这个以后就可以防降解么
...

只是有trizol这一步可以抑制RNase，其他步骤一定要小心
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10楼2015-08-01 14:06:39
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weiyounuli

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573009018: 金币+1 2015-07-31 16:49:05
573009018: 金币+1 2015-07-31 16:51:37
我都提了好几次了，加油！
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2楼2015-07-30 08:06:48
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peng1997

新虫 (小有名气)
部分降解吧
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3楼2015-07-30 14:18:32
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一叶扁周

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
降解了，RNA不稳定吗，很容易降解的
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4楼2015-07-30 15:19:19
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xiaochong8693

木虫之王 (文坛精英)
★
573009018: 金币+1 2015-07-31 16:51:22
为楼主留下满满的祝福
祝福楼主和各位虫友清凉一夏，事事如意，梦想成真！
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6楼2015-07-30 20:12:16
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andyzhengwp

金虫 (小有名气)
★
573009018: 金币+1 2015-07-31 16:50:52
降解了
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每天坚持一点点，终会成功！相信自己
8楼2015-07-31 15:04:09
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573009018

金虫 (初入文坛)

小硕在读
引用回帖:
7楼: Originally posted by yufeiwaner at 2015-07-31 10:12:44
哥们，你一次性做这么样品干嘛？？？样品越多，费的时间越多，RNA降解的可能性越大！还不如一次只提取4个样品。。。你从肝细胞里提取RNA么？另外你电泳得点marker啊
一般提取RNA，要求用刚拆不久的进口的EP管，吸头 ...

Trizol   不是加了这个以后就可以防降解么

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9楼2015-07-31 16:52:50
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