24小时热门版块排行榜    

查看: 1777  |  回复: 11

573009018

金虫 (初入文坛)

小硕在读

[交流] RNA提取相关疑问!!!

小弟第三次提RNA了,条带较模糊,似有拖带现象,三条带不明显,不明白哪里出了问题(可以确定的是操作可能比较慢),请有经验懂行的前辈指点!结果如图。

RNA提取相关疑问!!!
IMG_20150729_192334.jpg
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

liulingjun15

金虫 (小有名气)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-07-30 23:23:21
很明显降解了,操作上要注意,所有EP管,枪头都要无RNA酶
5楼2015-07-30 18:47:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yufeiwaner

新虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
573009018: 金币+8 2015-07-31 16:50:29
哥们,你一次性做这么样品干嘛???样品越多,费的时间越多,RNA降解的可能性越大!还不如一次只提取4个样品。。。你从肝细胞里提取RNA么?另外你电泳得点marker啊
一般提取RNA,要求用刚拆不久的进口的EP管,吸头,国产货一般要DEPC水处理,麻烦。。。加了氯仿振荡要激烈,吸取上清时不能吸到沉淀。一般在实验桌上操作就可以了,不放心的话放超净台里操作,区别只是后者不用戴口罩。下次电泳记得点marker。提取到RNA后要赶紧反转或者超低温保存。
另外你用试剂盒还是RNAplus、Trizol提取的?
7楼2015-07-31 10:12:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yufeiwaner

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
9楼: Originally posted by 573009018 at 2015-07-31 16:52:50
Trizol   不是加了这个以后就可以防降解么
...

只是有trizol这一步可以抑制RNase,其他步骤一定要小心
10楼2015-08-01 14:06:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

weiyounuli

新虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
573009018: 金币+1 2015-07-31 16:49:05
573009018: 金币+1 2015-07-31 16:51:37
我都提了好几次了,加油!
2楼2015-07-30 08:06:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

peng1997

新虫 (小有名气)

部分降解吧
3楼2015-07-30 14:18:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

一叶扁周

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
降解了,RNA不稳定吗,很容易降解的
4楼2015-07-30 15:19:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaochong8693

木虫之王 (文坛精英)


573009018: 金币+1 2015-07-31 16:51:22
为楼主留下满满的祝福
祝福楼主和各位虫友清凉一夏,事事如意,梦想成真!
6楼2015-07-30 20:12:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

andyzhengwp

金虫 (小有名气)


573009018: 金币+1 2015-07-31 16:50:52
降解了
每天坚持一点点,终会成功!相信自己
8楼2015-07-31 15:04:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

573009018

金虫 (初入文坛)

小硕在读

引用回帖:
7楼: Originally posted by yufeiwaner at 2015-07-31 10:12:44
哥们,你一次性做这么样品干嘛???样品越多,费的时间越多,RNA降解的可能性越大!还不如一次只提取4个样品。。。你从肝细胞里提取RNA么?另外你电泳得点marker啊
一般提取RNA,要求用刚拆不久的进口的EP管,吸头 ...

Trizol   不是加了这个以后就可以防降解么

[ 发自小木虫客户端 ]
9楼2015-07-31 16:52:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 573009018 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +26 医学老男孩 2026-08-13 56/2800 2026-08-15 13:47 by 医学老男孩
[考研] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 7lpolszZVXgi 2026-08-14 8/400 2026-08-15 11:53 by KxMI1BYBxWX1
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +6 Ldrop2023 2026-08-13 6/300 2026-08-15 10:09 by tuanggou
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 7lpolszZVXgi 2026-08-14 6/300 2026-08-15 09:28 by sunzitan
[公派出国] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 k0dTPqJtl0jt 2026-08-14 5/250 2026-08-15 07:09 by 4wMiSEwB6436
[找工作] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 k0dTPqJtl0jt 2026-08-14 4/200 2026-08-15 02:21 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +11 Tide man 2026-08-10 12/600 2026-08-15 02:12 by home3163
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 7/350 2026-08-15 00:40 by 4wMiSEwB6436
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 5/250 2026-08-15 00:16 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +23 Lanmanbaby 2026-08-09 37/1850 2026-08-14 13:40 by Equinoxhua
[硕博家园] 请教兼职经验 +3 是阿文鸭 2026-08-09 3/150 2026-08-14 12:07 by HER12025
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +10 家与远方 2026-08-10 15/750 2026-08-14 02:08 by 绵羊哥哥
[硕博家园] 一作与独作在应聘高校教师时区别大吗 +3 mbygzh 2026-08-08 4/200 2026-08-13 19:31 by 龙-樱
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 关于filecode,很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
信息提示
请填处理意见