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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » HPLC 液相出峰问题
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tuzilanlan

新虫 (初入文坛)

[交流] HPLC 液相出峰问题 已有15人参与

做液相的时候，换了一台机器，重新打标线的时候发现标线中标准样品出峰时间都为14min左右，但是实验样品中出峰时间都为6min左右，这是为什么？
标准样品中配制时可能有机溶剂比例较高（母液用纯乙腈溶解，之后用去离子水稀释的），
另外标准样品的实验样品的pH测过差不多的，仪器的流动相比例、温度都是固定的，
还可能有哪些原因导致出峰时间不一样啊？
大神求助！！！
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1楼 2015-12-02 13:34:00
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

yan1984

铁虫 (正式写手)
★
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如果其他条件（包括色谱柱）都一样的话，最大的可能就是流速不够或有点堵。
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3楼2015-12-02 17:23:40
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chenxj2832

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
6楼: Originally posted by tuzilanlan at 2015-12-03 15:37:42
同一根柱子。

看了你的描述，严重怀疑你的样品和对照品不是同一个东西。

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7楼2015-12-04 12:41:42
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普通回帖

chenxj2832

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
色谱柱是同一根吗？

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2楼2015-12-02 13:38:08
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zhaolianhai

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
如果是等度的，可能就是泵流速问题，如果是梯度的，有可能是有机相的泵流速慢了。环境温度或者柱温也正常？样品用什么溶解的，对保留时间的影响不至于那么大的，最可能的还是泵流速

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4楼2015-12-02 23:17:31
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tuzilanlan

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by zhaolianhai at 2015-12-02 23:17:31
如果是等度的，可能就是泵流速问题，如果是梯度的，有可能是有机相的泵流速慢了。环境温度或者柱温也正常？样品用什么溶解的，对保留时间的影响不至于那么大的，最可能的还是泵流速
...

泵流速设置为1ml/min，等度洗脱，样品用乙腈溶解，拿水稀释，流动相乙腈：水=70：30. 样品是一起进去的，前7个为标准样品，后7个为实验样品，标准样品中全为14min出峰，实验品为6min出峰，
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5楼2015-12-03 15:37:16
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tuzilanlan

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by chenxj2832 at 2015-12-02 13:38:08
色谱柱是同一根吗？

同一根柱子。
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6楼2015-12-03 15:37:42
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Yxijaier

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by chenxj2832 at 2015-12-04 12:41:42
看了你的描述，严重怀疑你的样品和对照品不是同一个东西。
...

一般不会出现这种情况才对啊
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8楼2015-12-05 23:23:56
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孙一妹

至尊木虫 (知名作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你不会是漏液了吧！我有次漏液就导致出峰晚，要不就是有些堵，流速不行

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9楼2015-12-05 23:26:50
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匿名

用户注销 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
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10楼2015-12-05 23:28:20
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