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shenbaode木虫 (小有名气)
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[求助]
HPLC不出峰？或峰型不好，出峰时间有问题？
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| 实验室有一台岛津HPLC，LC-20AT泵，SPD-M20A检测器。最近作分析时出了一点一点问题，无法排除。一个同学用C18柱测定甘草酸，反复进样，在相同位置会出杂峰，可以确定不是溶剂峰，且样品是干净的。（注：本人之前离开实验室一段时间，其他人做实验没有注意，把洗进样针用的甲醇抽干没有发现，且连续做了很多样品。）本人以为是进样针脏了，反复进甲醇，自动清洗多次，但效果不明显，仍然有杂峰。后来换成本人测自己的样品，用与自己前期相同的流动相和柱子测量，居然一个峰都不出。另一个同学找了一个貌似懂液相的人给看了说液相没有问题，且他的样品可以出峰。后来我自己又试了下，发现有机相是甲醇的时候出峰，乙腈的时候不出峰。我的样品流动相是乙腈和冰醋酸水溶液，咨询了下工程师，让我用梯度洗脱，出峰了，然后我改变流动相比例，把有机相（乙腈）比例升高（由22升至48），可以出峰，但出峰位置却和有机相为22时出峰仅缩短了1分钟，且峰型不好。应该可以确定有问题，但不清楚问题出在哪里？不知是流动相的原因还是仪器的原因。请高人指点。 |
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