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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » DNA-PCR扩增条带
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yeaizi520

新虫 (初入文坛)

[求助] DNA-PCR扩增条带 已有7人参与

为什么DNA进行PCR扩增后，跑胶的条带是这样的？求大神帮忙看看啊！！

DNA-PCR扩增条带
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1楼 2015-11-13 16:26:57
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TM3875

铁虫 (初入文坛)
电压过大了

发自小木虫Android客户端
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2楼2015-11-13 16:36:31
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yeaizi520

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by TM3875 at 2015-11-13 16:36:31
电压过大了

我的电压110,应该不高吧？
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3楼2015-11-13 17:24:34
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fMssop

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-11-14 22:56:05
如果是扩增大分子量的片段，出现这种条带很正常，楼主最好再优化下实验条件，包括制备高质量模板，酶选取高保真酶，反应条件再好好调下
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4楼2015-11-13 18:57:54
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木vs木

金虫 (小有名气)
DNA浓度太高

发自小木虫Android客户端
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坚持就是胜利！
5楼2015-11-13 21:15:08
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jackbaucer

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
加大退火温度。然后电压小点

发自小木虫Android客户端
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6楼2015-11-13 22:37:13
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小骆驼321

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
产物特异性不是很好吧😊，然后顺便问一下，你的marker加了多少，我都没有跑成功过1w以上的
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自助者天助
7楼2015-11-14 17:19:52
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andywang6137

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-11-14 22:56:28
marker跑的很好，不是电压问题。PCR产物太浓，降低模板，降低循环数，上样量减少，适当提高一下退火温度。
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8楼2015-11-14 20:43:09
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51mimi

新虫 (小有名气)
先看看最亮的地方，是不是你目的条带大小。

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9楼2015-11-14 21:57:44
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huanghao123

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
各位大神 我要找的是珍珠黄杨的一种基因  可是这个物种里面没有研究过这方面的基因  连黄杨科的近缘物种也没有   我就在ncbi上找了其他物种的基因保守区域来设计引物  是设计特异性引物  还是简并引物   我都设计了     可是 设计了n多对引物  还是没有P出自己想要的中间片段     望各位大神指点指点 谢啦   占用楼道  不好意思啊   兄弟
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10楼2015-11-15 10:44:30
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