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yf198400

新虫 (小有名气)


1.样品中有杂质,如蛋白,某些有机盐等。2.电泳条件问题。

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11楼2015-11-15 10:57:30
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gzbjzjchen

铜虫 (小有名气)

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感谢参与,应助指数 +1
注意退火温度,降低循环数

发自小木虫Android客户端
12楼2015-11-15 16:10:28
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yuanxiaoxin

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我也出现过这种情况,要是把退火温度梯度摸索过了还是这样那就果断换引物
13楼2015-11-15 17:12:11
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jim326

金虫 (正式写手)

减少模板量,增加退火温度,减少上样量,减小胶浓度,增加电泳时间,换新鲜电泳缓冲液

发自小木虫IOS客户端
14楼2015-11-15 17:44:33
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MarchZR

银虫 (小有名气)

电压胶浓度等工具maeker就知道应该没有问题的,拖尾现象严重点,是模板没有充分处理好模板纯度低了可以纯化在上样也可以,或者是酶用的多了,循环数多了,镁离子dNTP用量过多,这些参数首先按照使用的超保真Taq酶说明书上操作,如果发现结果不好,在根据现象优化条件,或者是同一批跑胶的时候你就开始做对照,自己设置一些条件当然只是改变各个成分的浓度,对仪器设置的参数退火温度等都是同样的,反正保持在8连管中互相都保持单一变量原则,还有你这都是样品,是否有对照组,最重要的是你的目的条带出来了没有
又一篇资料可以看看吧 提高PCR特异性的方法
15楼2015-11-24 09:21:16
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