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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » DNA-PCR扩增条带
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yf198400

新虫 (小有名气)
1.样品中有杂质，如蛋白，某些有机盐等。2.电泳条件问题。

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11楼2015-11-15 10:57:30
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gzbjzjchen

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
注意退火温度，降低循环数

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12楼2015-11-15 16:10:28
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yuanxiaoxin

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我也出现过这种情况，要是把退火温度梯度摸索过了还是这样那就果断换引物
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13楼2015-11-15 17:12:11
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jim326

金虫 (正式写手)
减少模板量，增加退火温度，减少上样量，减小胶浓度，增加电泳时间，换新鲜电泳缓冲液

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14楼2015-11-15 17:44:33
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MarchZR

银虫 (小有名气)
电压胶浓度等工具maeker就知道应该没有问题的，拖尾现象严重点，是模板没有充分处理好模板纯度低了可以纯化在上样也可以，或者是酶用的多了，循环数多了，镁离子dNTP用量过多，这些参数首先按照使用的超保真Taq酶说明书上操作，如果发现结果不好，在根据现象优化条件，或者是同一批跑胶的时候你就开始做对照，自己设置一些条件当然只是改变各个成分的浓度，对仪器设置的参数退火温度等都是同样的，反正保持在8连管中互相都保持单一变量原则，还有你这都是样品，是否有对照组，最重要的是你的目的条带出来了没有
又一篇资料可以看看吧 提高PCR特异性的方法
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15楼2015-11-24 09:21:16
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