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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » DNA-PCR扩增条带
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yeaizi520

新虫 (初入文坛)

[求助] DNA-PCR扩增条带 已有7人参与

为什么DNA进行PCR扩增后，跑胶的条带是这样的？求大神帮忙看看啊！！

DNA-PCR扩增条带
FC8C6715BD67FEF44330BC383E8C8B8B.jpg
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1楼 2015-11-13 16:26:57
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MarchZR

银虫 (小有名气)
电压胶浓度等工具maeker就知道应该没有问题的，拖尾现象严重点，是模板没有充分处理好模板纯度低了可以纯化在上样也可以，或者是酶用的多了，循环数多了，镁离子dNTP用量过多，这些参数首先按照使用的超保真Taq酶说明书上操作，如果发现结果不好，在根据现象优化条件，或者是同一批跑胶的时候你就开始做对照，自己设置一些条件当然只是改变各个成分的浓度，对仪器设置的参数退火温度等都是同样的，反正保持在8连管中互相都保持单一变量原则，还有你这都是样品，是否有对照组，最重要的是你的目的条带出来了没有
又一篇资料可以看看吧 提高PCR特异性的方法
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15楼2015-11-24 09:21:16
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TM3875

铁虫 (初入文坛)
电压过大了

发自小木虫Android客户端
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2楼2015-11-13 16:36:31
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yeaizi520

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by TM3875 at 2015-11-13 16:36:31
电压过大了

我的电压110,应该不高吧？
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3楼2015-11-13 17:24:34
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fMssop

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-11-14 22:56:05
如果是扩增大分子量的片段，出现这种条带很正常，楼主最好再优化下实验条件，包括制备高质量模板，酶选取高保真酶，反应条件再好好调下
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4楼2015-11-13 18:57:54
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