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yeaizi520

新虫 (初入文坛)

[求助] DNA-PCR扩增条带 已有7人参与

为什么DNA进行PCR扩增后,跑胶的条带是这样的?求大神帮忙看看啊!!

DNA-PCR扩增条带
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MarchZR

银虫 (小有名气)

电压胶浓度等工具maeker就知道应该没有问题的,拖尾现象严重点,是模板没有充分处理好模板纯度低了可以纯化在上样也可以,或者是酶用的多了,循环数多了,镁离子dNTP用量过多,这些参数首先按照使用的超保真Taq酶说明书上操作,如果发现结果不好,在根据现象优化条件,或者是同一批跑胶的时候你就开始做对照,自己设置一些条件当然只是改变各个成分的浓度,对仪器设置的参数退火温度等都是同样的,反正保持在8连管中互相都保持单一变量原则,还有你这都是样品,是否有对照组,最重要的是你的目的条带出来了没有
又一篇资料可以看看吧 提高PCR特异性的方法
15楼2015-11-24 09:21:16
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TM3875

铁虫 (初入文坛)

2楼2015-11-13 16:36:31
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yeaizi520

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by TM3875 at 2015-11-13 16:36:31
电压过大了

我的电压110,应该不高吧?
3楼2015-11-13 17:24:34
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fMssop

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-11-14 22:56:05
如果是扩增大分子量的片段,出现这种条带很正常,楼主最好再优化下实验条件,包括制备高质量模板,酶选取高保真酶,反应条件再好好调下
4楼2015-11-13 18:57:54
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