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菱紫369

铜虫 (初入文坛)

[求助] PCR后跑电泳有二聚体和模板条带没有目的条带为什么 已有3人参与

求前辈们帮忙,PCR后跑电泳有二聚体和模板条带没有目的条带为什么,我用的引物和程序和之前都是一样的,只是模板DNA是重新提的,急急急急,请路过的前辈稍停脚步指导一二
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梅林616

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by 菱紫369 at 2015-11-17 09:35:43
我平时用的是1%的胶,跑的DNA看上去没什么问题,我用别的引物p了,出了条带,感觉是引物问题,用0.6%和1%的胶有什么区别吗?...

胶浓度小适合分离大片段,浓度大时分离多个小片段

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每天都是一个新的开始
8楼2015-11-17 09:44:02
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普通回帖

xushiqi001

新虫 (小有名气)

可能是你模版的问题,重提一次,跑胶看看,如果还不行,重新设计引物吧。

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2楼2015-11-12 22:08:01
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总有二狗咬朕

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1.那应该不是电泳问题,还是看看你的目的基因有没有表达出来。
2.再看看模板。
3.不行就是引物不对。
我好累,承受这个年纪不该有的帅!
3楼2015-11-13 09:44:07
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zlaosan2

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
应该是模板问题,,建议用0.6%的胶跑一次总DNA电泳看看
4楼2015-11-13 09:59:23
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菱紫369

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by zlaosan2 at 2015-11-13 09:59:23
应该是模板问题,,建议用0.6%的胶跑一次总DNA电泳看看

我平时用的是1%的胶,跑的DNA看上去没什么问题,我用别的引物p了,出了条带,感觉是引物问题,用0.6%和1%的胶有什么区别吗?
5楼2015-11-17 09:35:43
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菱紫369

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by xushiqi001 at 2015-11-12 22:08:01
可能是你模版的问题,重提一次,跑胶看看,如果还不行,重新设计引物吧。

DNA重提了好几次了,在出和不出之间停电停了3天,对引物会不会有影响呢?
6楼2015-11-17 09:38:03
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菱紫369

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 总有二狗咬朕 at 2015-11-13 09:44:07
1.那应该不是电泳问题,还是看看你的目的基因有没有表达出来。
2.再看看模板。
3.不行就是引物不对。

停电,-20冰箱化了,对引物有没有影响ne ?
7楼2015-11-17 09:40:12
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梅林616

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by 菱紫369 at 2015-11-17 09:40:12
停电,-20冰箱化了,对引物有没有影响ne ?...

引物反复冻融一两次问题不大

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每天都是一个新的开始
9楼2015-11-17 09:45:03
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xushiqi001

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 菱紫369 at 2015-11-17 09:38:03
DNA重提了好几次了,在出和不出之间停电停了3天,对引物会不会有影响呢?...

应该没问题。

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» 本帖已获得的红花(最新10朵)

10楼2015-11-17 10:31:34
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