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quanweizhuce

木虫 (小有名气)

[交流] 质粒转化的结果鉴定

最近在做质粒转化实验,第一次接触有很多不懂的地方,几个问题想请教大家。

背景:
将新霉素抗性的质粒转入金黄色葡萄球菌内。抽提的质粒与新制备的金葡菌感受态细胞进行电转化,结束后将菌液涂布新霉素抗性平板内,37℃培养4天后,只有一块平板长出2个菌落,经观察两个菌落是金葡菌。

问题:
在论坛看了其他虫友关于质粒转化的评论,“抗生素的活性只能维持一段时间,常见的氨苄青霉素(Amp)在37℃大约能维持16小时(也就是过夜),时间太长后就失效了。一般抗生素只能抑制杂菌生长,并不能杀死它们,所以抗生素失效之后,杂菌就能长起来了。” 金葡菌通常涂板24小时肯定能长出来,可是我转化后涂板很久才长出两个菌落,时间是明显延长的,请问,新霉素的抗性也是只能维持一段时间吗?大约多久?
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quanweizhuce

木虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by liuwukang at 2015-10-31 22:34:08
你是怎么转化到金葡里面的?电转?我用过氨苄 氯霉素 卡那霉素和红霉素的筛选,一般转化成功的五到六个小时都能长出来,最多过夜也长出来了

电转化的,第一次做也没有什么经验,请问你也是转化到金葡的吗?能问下具体protocol吗?谢谢!
7楼2015-11-01 09:05:17
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小小sao年

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
4天....,你确定那两个不是杂菌吗,怎么感觉没转进去

发自小木虫IOS客户端
2楼2015-10-30 16:55:35
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蜗牛先生吃葱

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
四天时间太长了,一般过夜就长起来了,那两个很有可能是杂菌了

发自小木虫Android客户端
蜗牛先生学生物
3楼2015-10-30 21:28:55
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liuwukang

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你是怎么转化到金葡里面的?电转?我用过氨苄 氯霉素 卡那霉素和红霉素的筛选,一般转化成功的五到六个小时都能长出来,最多过夜也长出来了

发自小木虫Android客户端
4楼2015-10-31 22:34:08
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