应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 测序结果5‘端和3’端经常会出现错误吗？
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
121/2返回列表12下一页
查看: 3823  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

tianti_121

新虫 (小有名气)

[求助] 测序结果5‘端和3’端经常会出现错误吗？ 已有6人参与

我有好几处测序5‘端和3’端都会与设计的引物序列不一样，是测序结果不准确呢，还是真的PCR的问题呢？

附图大家帮忙给看看。起始密码子是ATG，结果却是CAT?终止密码子TAA，测序结果却是AAA？这到底是怎么一回事？不解中！

谢谢大家！

测序结果5‘端和3’端经常会出现错误吗？
终止密码子部位.png


测序结果5‘端和3’端经常会出现错误吗？-1
起始密码子部位.png
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2015-10-22 17:00:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

sunshine436

新虫 (小有名气)
遇到这种情况，要看峰图上读的是什么，另外你的测序引物设计的要离目的基因远一点，要不然读的不准确。

发自小木虫Android客户端
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2015-10-22 17:57:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

厚德求是

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你看看公司发给你的那个峰图，而不是这个生成的文本，你去看看对应的位点峰图乱不乱，如果很乱可能就是测序出了问题。

发自小木虫IOS客户端
赞一下(2人) 回复此楼
8楼2015-10-23 08:12:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

徐小培

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
一般前后都不准确，尤其是后面800bp以后，都有可能不正确，但是最好结合峰图来判断。
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2015-10-23 09:10:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是连载体测序还是直接PCR产物测序？
赞一下 回复此楼
3楼2015-10-22 20:34:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tianti_121

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by stone2239 at 2015-10-22 20:34:05
是连载体测序还是直接PCR产物测序？

连载体测序，puc19，目的基因大概1500左右，使用通用引物M17测序
赞一下 回复此楼
4楼2015-10-22 23:00:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by tianti_121 at 2015-10-22 23:00:11
连载体测序，puc19，目的基因大概1500左右，使用通用引物M17测序...

你的引物就在起始密码子和终止密码子吗？如果是这样，你测的又都是这两个位置有问题，那我觉得是引物合成出错了。
赞一下 回复此楼
5楼2015-10-22 23:48:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

~春梦秋云~

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
从你的图看，前面也没有多少了，应该是测序引物太近了，一般从测序开始有几十个是不准的！

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
相信黎明不会失约，相信付出必有回报！
6楼2015-10-23 00:13:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tolobio

新虫 (小有名气)
重点看峰图。
回复此楼
7楼2015-10-23 06:42:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mlbiosci

新虫 (正式写手)
八百以内直接看可以，超过八百两端可能不准，有疑问看峰图，多数情况下不会出错。大片段测序尽量双向测通。使用通用引物测序，目的基因两侧应该不会有大问题吧

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
10楼2015-10-24 00:28:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 tianti_121 的主题更新
121/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085600材料与化工调剂 +20 kikiki7 2026-03-30 20/1000 2026-04-03 01:19 by BruceLiu320
[考研] 271分求调剂学校 +3 zph158488！ 2026-04-02 3/150 2026-04-03 00:01 by wwytracy
[考研] 一志愿深大085601材料工程专业（专硕）300分可以调剂去哪 +7 10160315 2026-04-02 7/350 2026-04-02 22:48 by liveagain126
[考研] 求调剂 +5 朔朔话 2026-04-02 6/300 2026-04-02 22:02 by barlinike
[考研] 322求调剂：一志愿湖南大学 材料与化工（085600），已过六级。 +12 XX小邓 2026-03-29 13/650 2026-04-02 21:39 by 百灵童888
[考研] 一志愿武汉理工0856，初试334 +3 26考研材料 2026-04-02 3/150 2026-04-02 21:22 by dongzh2009
[考研] 学硕机械工程303求调剂 +5 无名所以叫吴明 2026-03-30 5/250 2026-04-02 20:12 by hengsmith
[考研] 288求调剂 一志愿哈工大 材料与化工 +31 洛神哥哥 2026-03-31 33/1650 2026-04-02 20:00 by tianyyysss
[考研] 085900土木水利336分求调剂 +4 Zhangjiangj 2026-03-31 6/300 2026-04-02 11:40 by 1753564080
[考研] 一志愿北交大材料工程总分358 +3 cs0106 2026-04-02 5/250 2026-04-02 11:37 by olim
[考研] 270调剂 +7 maxjxbsk 2026-04-02 7/350 2026-04-02 09:50 by yulian1987
[考研] 材料调剂 +11 一样YWY 2026-03-31 11/550 2026-04-01 22:25 by zhouyuwinner
[考研] 311求调剂 +10 李芷新1 2026-03-31 10/500 2026-04-01 14:38 by chenqifeng666
[考研] 一志愿北交材料工程总分358 +5 cs0106 2026-04-01 7/350 2026-04-01 11:45 by wangjy2002
[考研] 0855机械初试280求调剂 +3 kazenotori 2026-03-31 3/150 2026-04-01 10:08 by JourneyLucky
[考研] 299求调剂 +8 嗯嗯嗯嗯2 2026-03-27 8/400 2026-03-31 18:23 by lizhi8172
[考研] 求化学调剂 +12 wulanna 2026-03-28 12/600 2026-03-31 16:38 by 690616278
[考研] 本科双非材料，跨考一志愿华电085801电气，283求调剂，任何专业都可以 +6 芝士雪baoo 2026-03-28 8/400 2026-03-29 08:16 by 松花缸1201
[考研] 数一英一271专硕（085401）求调剂，可跨 +7 前行必有光 2026-03-28 8/400 2026-03-28 23:22 by 小木虫tim
[考研] 295求调剂 +5 1428151015 2026-03-27 6/300 2026-03-28 04:04 by fmesaito
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭