| 查看: 12290 | 回复: 16 | ||
[求助]
启动子与ATG的问题 已有4人参与
|
||
|
各位大神，我在做表达载体，因为一开始没经验，当初在设计引物的时候在5’和3’端都加上了保护碱基（貌似都只在5‘端加）， 结果现在做出来的表达载体测序发现在目的基因前面多了2个碱基。 我的目的基因本身是ATG开始，TAA结尾的，现在相当于在ATG前面多了CG两个碱基。 我用的pET-28α（+），NheI、XhoI双酶切，看了下图谱，从T7启动子到目的基因之间载体本身还有2个ATG位点，我又好死不死的在 目的基因前面多加了个CG，现在搞得不是3的整数倍了…… 想请教大家，启动子转录之后的翻译是怎样的？是从载体本身的第一个ATG开始，还是从每一个ATG都会各自翻译出一条蛋白 我现在希望它能从目的基因的开头那个ATG翻译出来一条，那前面那个CG是不是就不会引起后面的框移突变了？  谢谢各位了!! |
回复此楼» 猜你喜欢
解密度鲁特韦——新一代HIV整合酶抑制剂的化学、药理与产业化图景
已经有0人回复
-
左炔诺孕酮从沃氏氧化物到炔基化反应的工艺迭代与靶点解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有164人回复
-
“关闭瘙痒信号”的多肽地非法林醋酸盐全解析
已经有1人回复
-
Tosylate-DPA-714介导¹⁸F-DPA-714 PET成像的前沿进展
已经有0人回复
-
I-BRD9: BRD9溴结构域化学探针，BET选择性>700倍
已经有0人回复
-
莫那利珠单抗阻断NKG2A/HLA-E抑制通路 | Biochempartner
已经有0人回复
-
GSPT1口服分子胶降解剂MRT-2359 | Biochempartner
已经有0人回复
-
碳青霉烯类抗生素为何需联用西司他丁钠？ | Biochempartner
已经有0人回复
-
源自蕨类植物的抗炎美白活性分子去甲氧基荚果蕨素 | Biochempartner
已经有0人回复
-
肠道里的"代谢开关"：Fexaramine用肠道限制性重新定义 FXR 激动剂
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 有关pPICZA、pPIC9K酵母表达质粒如何正确构建载体表达蛋白
已经有6人回复
- 表达载体构建问题
已经有1人回复
- 基因克隆问题，构建载体，引物设计问题
已经有2人回复
- 求助在载体构建过程中，信号肽与GFP的引物设计、启动子切除以及读码框的问题
已经有3人回复
- 原核表达问题
已经有1人回复
- 请大家看看这个eGFP真核载体，为什么转染Sp2/0后看不到荧光？
已经有5人回复
- 【求助/交流】载体构建方面，在线等
已经有4人回复
- 【专题】PCR实验技术指南
已经有535人回复
6楼2015-12-16 16:59:24
科学小覃
木虫 (正式写手)
- 应助: 43 (小学生)
- 金币: 2426.9
- 散金: 100
- 红花: 8
- 帖子: 725
- 在线: 86.1小时
- 虫号: 3126634
- 注册: 2014-04-10
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
13楼2015-12-17 19:17:55
wujiangjack
银虫 (初入文坛)
- 应助: 6 (幼儿园)
- 金币: 478.8
- 帖子: 47
- 在线: 128.5小时
- 虫号: 502229
- 注册: 2008-02-14
- 性别: GG
- 专业: 植物遗传学
2楼2015-12-16 10:11:55
3楼2015-12-16 10:19:42
4楼2015-12-16 14:41:12
5楼2015-12-16 15:31:51
7楼2015-12-16 19:25:20
hanxiaominhu
至尊木虫 (著名写手)
- 应助: 126 (高中生)
- 金币: 25793.4
- 散金: 127
- 红花: 14
- 帖子: 2978
- 在线: 846.8小时
- 虫号: 1526260
- 注册: 2011-12-06
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
8楼2015-12-17 08:33:05
9楼2015-12-17 09:31:33
yangtzelv
新虫 (小有名气)
- 应助: 7 (幼儿园)
- 金币: 2595.5
- 散金: 300
- 红花: 4
- 帖子: 297
- 在线: 145.2小时
- 虫号: 1107840
- 注册: 2010-09-25
- 性别: GG
- 专业: 系统生物学
10楼2015-12-17 17:01:42