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启动子与ATG的问题 已有4人参与
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各位大神，我在做表达载体，因为一开始没经验，当初在设计引物的时候在5’和3’端都加上了保护碱基（貌似都只在5‘端加）， 结果现在做出来的表达载体测序发现在目的基因前面多了2个碱基。 我的目的基因本身是ATG开始，TAA结尾的，现在相当于在ATG前面多了CG两个碱基。 我用的pET-28α（+），NheI、XhoI双酶切，看了下图谱，从T7启动子到目的基因之间载体本身还有2个ATG位点，我又好死不死的在 目的基因前面多加了个CG，现在搞得不是3的整数倍了…… 想请教大家，启动子转录之后的翻译是怎样的？是从载体本身的第一个ATG开始，还是从每一个ATG都会各自翻译出一条蛋白 我现在希望它能从目的基因的开头那个ATG翻译出来一条，那前面那个CG是不是就不会引起后面的框移突变了？  谢谢各位了!! |
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