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悦赏花开花落

新虫 (初入文坛)

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[求助] 蛋白纯化不挂柱已有5人参与

我的蛋白n端带有his标签，多以包涵体形式存在，经过多种尝试，目前可以有少量的上清表达。对其进行纯化时，将填料和上清在4度孵育两个小时，却发现没有挂柱直接流出，求助是什么原因又可以进行什么探索。谢谢！

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1楼 2015-10-09 20:34:06

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引用回帖:

4楼: Originally posted by kxx520 at 2015-10-10 10:03:25
我的也不是完全不挂柱，就是跑胶出来看杂带多，目的蛋白少，杂带太多了～蛋白浓度也低～所以就选择包涵体了～包涵体纯化出来后的条带相当漂亮啊。因为我们做的是免疫，所以，不需要检测复性后活性～我们就直接免疫动 ...

我的也是杂带很多，但是我的目的蛋白一点也不挂柱，我一直觉得复性风险太大，还需要摸索，所以想在上清中纯化。

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