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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 求助RNA提取电泳图分析
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A张盈

铜虫 (初入文坛)

[求助] 求助RNA提取电泳图分析 已有4人参与

有哪位大神帮忙分析下，我是提的放线菌中的RNA，第一个胶孔是2000的maker，总感觉跑出的条带对应的大小不太对，哪位大神帮忙分析下，谢谢
求助RNA提取电泳图分析
IMG_20150929_112015.jpg
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1楼 2015-09-29 14:07:08
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DanceMacabre

新虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by A张盈 at 2015-09-29 19:12:32
胶的浓度用的1%的胶，电泳时用的80V，将近40min...

你那样肯定跑不出漂亮图，你按我的条件来搞，看看

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8楼2015-09-29 19:24:09
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然处

金虫 (小有名气)
rna有些降解，分子大小的话，用marker对比也不太正确，毕竟dna和rna还有有结构上的差别的

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迷茫会结束的
2楼2015-09-29 16:58:58
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dorecnu

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-09-29 22:34:38
理想的RNA提取条带应该是三条28S,18S,5S亮度上应该依次减弱28S最亮，18S次之，5S最弱。但是在实际试验中我们往往只能获得两条条带，这取决于你后续的实验精度要求，如果是普通的定量PCR的话，我倒是建议你先将这个RNA反转录进行后续的实验，看看结果如何。有的物种RNA提取条带因为复杂的原因不能呈现典型的三条带，但并不影响后续的实验。我就有师姐一直纠结与RNA条带不清晰，但是我们后续进行芯片杂交的时候发现也能满足分析的要求。所以我也建议你先进行后续的实验看看，莫纠结。另外，从电泳图上看，凝胶孔有杂质，是蛋白污染的可能性比较大，所以建议你采取相应的前处理措施。
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3楼2015-09-29 17:08:10
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DanceMacabre

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-09-29 22:34:58
胶的浓度，配1.5的胶。电泳时间，3min。RNA提取过程，在冰上低温;加乙醇洗涤后，加水溶解时，在超净台搞。做实验时，穿实验服，戴口罩。结果包你满意。

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4楼2015-09-29 17:55:46
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