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第二章 RNA提取与纯化
主题1:RNA电泳只有5S
链接:http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=910041&fpage=2
解答1:jasco
降解
解答2:raindrop8316
降解了;时间跑长了(5s和18s都跑出去了,就剩28s了)
主题2:哪位用TRIzol法提过樱花的总RNA?
链接:http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=481566&fpage=259
解答1:johnsooh
如果你是平行作的烟草、番茄可以提的出来,而樱花、樱桃、桃子提不出来,那么可能要求更改针对特殊植物样本的提取方法了,可是,如果不是平行操作,平行电泳检测,则不能说明方法有问题,建议重新作
解答2:telomerase
从富含多糖的植物组织中提取和纯化RNA (方法详见链接 8楼)
主题3:SDS/酚法提植物RNA 为什么沉淀不是白色
链接:http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=595187&fpage=188
解答1:reasonspare
没有关系, 你比如说提取的是植物叶片或茎, 无论你研磨多小, 都会有些色素干扰,所以 操作的质量好不好,关键看结果,如果结果不好: 如果是降解了,那就从防止RNase 入手,如果提到的量少,或者有DNA 或蛋白的污染, 就要从操作上改进,具体怎么改进,我觉得这个方法很成熟,只有工作做到位,肯定能出来。。。。。。
解答2:guohuayin
你提取的RNA中有色素,也就是说你在吸取上清的时候,尽量少吸些,宁缺勿滥,只要提取的RNA质量好,肯定能反转录出来,我试过,我提取的RNA也含有色素,但是RNA质量好,也反转录出来了
主题4:RNA提取OD260/280>4.0?
链接:http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=504545&fpage=246
解答1:轻5飞扬
有没可能是你提的不错,但跑电泳时上样太高,以致看到拖影,至于OD值么,呵呵,我觉得一般来讲都不是很准,当然4可能确实有些太过了,呵呵,你做什么呀,如果要求一严格的话,直接RT一下,有你要的东西不就OK了么
解答2:yang22181
拖影应该是降解的结果吧!?
OD值的比值肯定错误!检查你的分光光度计(找个已知浓度溶液)和比色杯(应用配套石英杯)!
解答3:lanyu270
降解了,肯定>2.2为降解。
解答4:fruit
有不同的溶液OD值是不同的,用DEPC水可能会偏低,有tris可能会偏高,用蒸馏水试试。
主题5:花的RNA提取问题
链接:http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=518971&fpage=208
解答1:puma2003
是不是花中的本来含量就少啊
解答2:wpszy2000
短链的RNA用这种方法不行的,要用超离心法!
解答3:hn8265
花的含水量如果高的话,在提取的时候很易被降解。你可以试试少放些样品,或多加些Tirzol.
解答4:鲸鱼001
试试其他方法,用LiCL沉淀法看看,能不能行,还有你的花最好不要带露水。
氯化锂沉淀法很容易可以搜到。 |
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