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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » （木虫生物专题讨论）之核酸提取纯化专题贴
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raindrop8316

金虫 (正式写手)

[资源] （木虫生物专题讨论）之核酸提取纯化专题贴

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继续招帖子工，招聘链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=910794&fpage=1
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不才经过半个多月的整理，核酸提取纯化专题终于完成了。

本专题共分两篇
一为技巧篇
二为解惑篇

其中每篇分别整理成三章：
DNA，RNA（含mRNA）和质粒。

请各位多多支持！

如果你觉得你从中学到了一点东西，
就把它顶起来吧，
让更多的人从中获益~


[ Last edited by raindrop8316 on 2008-8-19 at 08:44 ]
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1楼 2008-08-15 17:10:42
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raindrop8316

金虫 (正式写手)
第一章 DNA提取与纯化
主题31： DNA提取电泳图分析（拖尾，点样孔亮）
链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=695090&fpage=127
解答1：marongfeng  
点样孔处比较亮，可能就是多糖比较多。拖尾的话可能是轻微的讲解吧。至于做杂交就不知道可不可以了。如果做测序肯定要纯化。
解答2：fw1980613  
点样孔的是杂质，提取用的样品最好用鲜样。
最好别用做杂交。
杂交选择质量好的DNA。
解答3：JayKing999  
点样孔有亮度应该是实验操作的问题。电泳时尽量小心的将将枪头深入点样孔后再打出，DNA放置时间长有降解对杂交应该没太大的问题。我们实验室有用了半年的DNA做PCR、杂交都没问题。

主题32：DNA提取问题（酚仿抽提后离心总是出现混浊，离不下去）
链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=399218&fpage=127
解答1：浪迹天涯  
可能是你的样品混有其他杂质。
解答2：eleenjane  
试剂的问题？
解答3：heda0691  
把转速提高些试试（10000-12000rpm，10min），好象有点效果。
解答4：suneternal  
我觉得可能是中间乳化剂的问题，另外可能是温度比较低。
我也经常提出DNA，是从动物组织中。开始的时候也出过一些问题，但我尽量能把每一步做到标准化，现在是基本没出过问题了。
我觉得你加入样品多少（磨完后在加CTAB前称一下样品），加多少CTAB，再加多少酚氯仿，最好都有一个比例。这样做虽然有点繁琐，但我觉得中间出了问题也好知道在哪里。
解答5：yaoqian622  
在材料研磨时要注意材料量，尽量作到研磨成粉状，用1.5ml离心管装时液氮粉的量不要超过0.5ml的线，建议多次离心抽提，适量提高转速，但也不要过高。

主题33：大曲中微生物DNA的提取方法
链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=888791&fpage=23
无解答

主题34：关于HBV DNA提取
链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=829660&fpage=53
解答1：wjswj  
经典的核酸提取方法通常是加去污剂（SDS等）裂解细胞，经蛋白酶处理、有机溶剂提取及乙醇沉淀等步骤。（全部解答见链接）。

主题35：请教热裂解法提取细胞DNA（在50个细胞中得到基因组DNA）
链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=845366&fpage=45
无解答
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12楼2008-08-15 17:30:31
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raindrop8316

金虫 (正式写手)

I．技巧篇

第一章 DNA提取与纯化

主题1：特殊组织DNA的提取及鉴定
链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=103984&fpage=428
发帖人：liyuanzhang007  

主题2：细菌基因组DNA的提取方法综述
链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=154434&fpage=412
发帖人：zhao7749  

主题3：植物总DNA的提取方法
链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=160249&fpage=411
发帖人：johnnyhuang  

主题4：DNA提取方法 影响提取质量的因素 提高提取质量的方法
链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=162756&fpage=410
发帖人：cocohud  

主题5：种子DNA提取方法
链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=324889&fpage=343
发帖人：收获的金秋

主题6：对一些DNA提取方法的总结
链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=344670&fpage=287
发帖人：sunlei1981  

主题7：动物总DNA提取
链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=448490&fpage=280
发帖人：xyz4718  

主题8：真菌DNA的提取
链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=459036&fpage=273
发帖人：qiulilf  

以下为付费下载部分

主题9：DNA电泳常见问题分析
链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=257556&fpage=373
发帖人：fhang0427  

主题10：SDS法：植物DNA的小量提取
链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=579001&fpage=200
发帖人：shining-rose
主题11：DNA提取方法
链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=192019&fpage=268
发帖人：zhaowei

主题12：动物肝脏DNA的提取
链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=151532&fpage=410
发帖人：jiyuanyao  

主题13：细菌染色体DNA的大量提取与纯化
链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=461067&fpage=272
发帖人：ls2046

主题14：石蜡包埋组织的DNA提取及其应用
链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=587300&fpage=194
发帖人：applepie119

主题15：血液样本DNA的提取
链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=730030&fpage=111
发帖人： 萧潇

[ Last edited by raindrop8316 on 2008-8-15 at 17:16 ]
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2楼2008-08-15 17:13:35
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raindrop8316

金虫 (正式写手)
第二章 RNA提取与纯化

主题1：RNA抽提细节技巧小总结
链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=840058&fpage=16
发帖人：xewangjie2004
主题2：RNA抽提指南
链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=105429&fpage=428
发帖人：gene121  
主题3：提取悬浮细胞RNA
链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=107141&fpage=427
发帖人：heck
主题4：病毒RNA提取实验方法
链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=169004&fpage=408
发帖人：cocohud  
主题5：RNA操作中的一般要求
链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=168997&fpage=408
发帖人：cocohud  

主题6：RNA提取实验方法流程
链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=169006&fpage=407
发帖人：cocohud  
主题7：RNA操作注意事项与实验技巧
链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=165085&fpage=359
发帖人：cocohud  
主题8：mRNA的制备
链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=230087&fpage=390
发帖人：三生石126
主题9：mRNA提取、分离纯化
链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=313004&fpage=349
发帖人：yoyoh0032  
主题10：RNA抽提中自备有机溶液的配制及保存问题
链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=346525&fpage=317
发帖人：badger

主题11：植物组织RNA提取的难点及对策
链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=204181&fpage=277
发帖人：canegump  
主题12：总RNA的非变性电泳检测
链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=484702&fpage=258
发帖人：forest200195
主题13：总RNA的提取
链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=739164&fpage=106
发帖人：zuolili213
主题14：RNA抽提细节技巧小总结
链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=840058&fpage=3
发帖人：xewangjie2004
主题15：总RNA的提取
链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=577045&fpage=86
发帖人：shining-rose

主题16：RNA抽提的技术及注意问题
链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=695053&fpage=128
发帖人： 静水深流106  

以下为付费下载部分

主题17：RNA提取及常见问题分析
链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=754342&fpage=98
发帖人：passion_jh
主题18：RNA提取心得
链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=584469&fpage=196
发帖人：applepie119
主题19：RNA的提取
链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=268042&fpage=310
发帖人：nmwhf  
主题20：从RNA抽提到电泳鉴定
链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=550336&fpage=215
发帖人：游乐天

主题21：植物RNA提取过程中多糖干扰的对策
链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=255239&fpage=375
发帖人：jimchen7909  
主题22：植物总RNA提取
链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=595262&fpage=188
发帖人：applepie119
主题23：提取RNA的实验课件
链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=109041&fpage=427
发帖人：sohu123456  
主题24：RNA的提取和cDNA合成原理和实验方法
链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=169002&fpage=408
发帖人：cocohud  
主题25：霉菌总RNA的制备
链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=351453&fpage=291
发帖人：microliu  

主题26：mRNA抽提操作手册
链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=594155&fpage=184
发帖人：applepie119  
主题27：提取优质RNA的方法
链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=418186&fpage=288
发帖人：raoqun20  
主题28：RNA抽提技术及注意事项
链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=598276&fpage=169
发帖人：duduhua
主题29：提取优质RNA的方法
链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=514684&fpage=147
发帖人：dhszheng

[ Last edited by raindrop8316 on 2008-8-15 at 17:17 ]
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3楼2008-08-15 17:15:07
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raindrop8316

金虫 (正式写手)
第三章 质粒提取与纯化
主题1：质粒DNA的分离纯化和鉴定
链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=142066&fpage=418
发帖人：okaysee  

主题2：一步法提取质粒DNA
链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=202040&fpage=398
发帖人：aronxu  

主题3：质粒DNA提取及琼脂糖凝胶电泳
链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=417117&fpage=295
发帖人：raoqun20  

主题4：质粒DNA提取试验常见问题解答
链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=462010&fpage=270
发帖人：beingking  

主题5：质粒DNA的分离、纯化和鉴定
链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=543443&fpage=219
发帖人：lgj7966

主题6：转一篇关于质粒DNA提取原理的很棒的文章
链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=772205&fpage=71
发帖人：wjswj  

以下为付费下载部分

主题7：质粒DNA的提取及浓度检测
链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=595213&fpage=189
发帖人：applepie119  

主题8：质粒快速提取试剂盒
链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=595209&fpage=189
发帖人：applepie119
  
主题9：质粒DNA的提取和纯化
链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=102712&fpage=429
发帖人：pzhangyh  

主题10：质粒提取简介及问题分析
链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=666139&fpage=141
发帖人：yangym1123
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4楼2008-08-15 17:17:49
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