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chenlugb

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[交流] [求助]DNA提取的问题

我在DNA提取过程中，在加入酚：氯仿：异戊醇（25：24：1）后离心总是出现混浊，离不下去，那位高手知道是怎么回事啊？

[ Last edited by telomerase on 2007-11-13 at 11:32 ]

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关于核磁制样已经有3人回复
郑州大学申博已经有6人回复

1楼 2007-01-27 13:53:52

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浪迹天涯

铜虫 (初入文坛)

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可能是你的样品有其它杂质。

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2楼2007-01-27 15:23:57

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eleenjane

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试剂的问题？

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3楼2007-01-27 15:54:16

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无根萍

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请问你从什么材料中提取DNA? 这是因为不同材料含有的杂质不一样，因此才能给予你适当的解决办法。另外建议你不凡把你的提取方案告诉大家，这样才有针对性的给予你的具体解决办法。

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学术交流的联系方式： huangqingbeijing@yahoo.com.cn

4楼2007-01-27 16:08:53

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chenlugb

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我是用梨叶片做的，试剂没有问题，因为不是每个都出不来，是部分样品混浊，我用的CTAB提取法，方案就是先用液氮研磨叶片，加入预热的CTAB提取液2mL，混匀，65℃温浴30min，冷却至室温，5300rpm离心15min

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5楼2007-01-27 19:09:36

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heda0691

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★
telomerase(金币+1,VIP+0):thanks！

我也碰到过这种情况，原因说不清。把转速提高些试试（10000-12000rpm，10min），好象有点效果。

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坚果的事业贵在坚持

6楼2007-01-27 19:53:31

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suneternal

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★
telomerase(金币+1,VIP+0):谢谢分析！！

我觉得可能是中间乳化剂的问题，另外可能是温度比较低。
我也经常提出DNA，是从动物组织中。开始的时候也出过一些问题，但我尽量能把每一步做到标准化，现在是基本没出过问题了。
我觉得你加入样品多少（磨完后在加CTAB前称一下样品），加多少CTAB，再加多少酚氯仿，最好都有一个比例。这样做虽然有点繁琐，但我觉得中间出了问题也好知道在哪里。
你也可以象楼上说的，加大离心速度。

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7楼2007-01-27 23:41:20

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