应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » real-time PCR跑出来的图像很奇怪，求大神指导，我是新人第一次做这个，拜托拜托
181/2返回列表12下一页
查看: 2000  |  回复: 17
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

哎呀那个雨

铜虫 (初入文坛)

[求助] real-time PCR跑出来的图像很奇怪，求大神指导，我是新人第一次做这个，拜托拜托 已有5人参与

我用的是质粒模板，100ng-5ng的我都试过，几乎都是这样的图片，用的Taqman  MGB探针，引物终浓度300nM,探针200nM,求指导是什么情况

real-time PCR跑出来的图像很奇怪，求大神指导，我是新人第一次做这个，拜托拜托
308.jpg


real-time PCR跑出来的图像很奇怪，求大神指导，我是新人第一次做这个，拜托拜托-1
336.jpg


real-time PCR跑出来的图像很奇怪，求大神指导，我是新人第一次做这个，拜托拜托-2
351.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
啊
1楼 2015-07-09 12:52:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

冷雁孤旅

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-07-13 23:13:56
你的模板太少了 或者是你的试剂有问题   几乎没有平台期 说明产物少 你看看你的时间是不是有问题  以及你的退火温度是不是过高
赞一下(1人) 回复此楼
生命不息奋斗不止
7楼2015-07-10 00:26:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冷雁孤旅

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
哎呀那个雨: 金币+5 2015-07-13 15:48:57
我用的就是ABI 7300系统  而且你的溶解曲线压根就没有  也说明你的产物是不存在的  综和以上分析  解决方案 1.检查试剂是否有问题  2.引物是不是压根那就错了 3.退火温度太高了 导致 扩增失败
赞一下(1人) 回复此楼
生命不息奋斗不止
8楼2015-07-10 00:28:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

love_st

金虫 (著名写手)
没有扩增呗
回复此楼
2楼2015-07-09 13:17:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

许彦

木虫 (正式写手)
根本就没有扩增

[ 发自小木虫客户端 ]
回复此楼
3楼2015-07-09 14:41:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wsad5213

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-07-13 23:14:14
你跑的PCR程序有问题把，如果有扩增条带应该出现峰的，可能你加样的时候哪个环节出了问题，你可以用内参基因对比着做一下
赞一下 回复此楼
4楼2015-07-09 16:11:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

vege的桌子

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
绝对是没有扩增，我做荧光定量，阴性对照就是这种情况
赞一下 回复此楼
5楼2015-07-09 21:19:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

vincent_530

禁虫 (初入文坛)
★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-07-13 23:14:34
本帖内容被屏蔽
6楼2015-07-09 22:05:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1314308002

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
qPCR条件要优化下，或者引物设计得不好
赞一下 回复此楼
9楼2015-07-12 10:22:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

哎呀那个雨

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 冷雁孤旅 at 2015-07-10 00:26:18
你的模板太少了 或者是你的试剂有问题   几乎没有平台期 说明产物少 你看看你的时间是不是有问题  以及你的退火温度是不是过高

谢谢，确实是退火温度 高了，我尝试着把温度降低了p出来了
赞一下 回复此楼
啊
10楼2015-07-13 15:47:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 哎呀那个雨 的主题更新
181/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 X5bHxOULxFqb 2026-10-30 17/850 2026-11-01 06:48 by YXM1FDCSE8Bn
[基金申请] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 X5bHxOULxFqb 2026-10-30 21/1050 2026-11-01 06:46 by YXM1FDCSE8Bn
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 X5bHxOULxFqb 2026-10-30 21/1050 2026-11-01 06:46 by YXM1FDCSE8Bn
[基金申请] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 xvJS1BYDxvBS 2026-10-31 8/400 2026-11-01 05:48 by YXM1FDCSE8Bn
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 xvJS1BYDxvBS 2026-10-31 8/400 2026-11-01 05:43 by YXM1FDCSE8Bn
[公派出国] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-31 6/300 2026-11-01 05:41 by YXM1FDCSE8Bn
[基金申请] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-31 3/150 2026-11-01 04:04 by YXM1FDCSE8Bn
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-31 7/350 2026-11-01 04:04 by YXM1FDCSE8Bn
[找工作] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-31 6/300 2026-11-01 03:56 by YXM1FDCSE8Bn
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 15/750 2026-11-01 03:51 by YXM1FDCSE8Bn
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 13/650 2026-11-01 03:46 by YXM1FDCSE8Bn
[论文投稿] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 X5bHxOULxFqb 2026-10-30 25/1250 2026-11-01 03:30 by YXM1FDCSE8Bn
[考博] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-31 5/250 2026-11-01 02:25 by YXM1FDCSE8Bn
[考研] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 12/600 2026-11-01 02:19 by YXM1FDCSE8Bn
[公派出国] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-31 4/200 2026-11-01 00:41 by YXM1FDCSE8Bn
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 X5bHxOULxFqb 2026-10-30 12/600 2026-11-01 00:15 by YXM1FDCSE8Bn
[考博] 2027博士申请-临床检验诊断学、病原生物学、微生物方向 50+3 yyh@ 2026-10-28 4/200 2026-10-31 12:47 by 可淡不可忘
[基金申请] 论文的挂名怎么评判贡献？基金申请中，排名第一的挂名文章 +3 biily 2026-10-25 3/150 2026-10-30 18:33 by 旁观2020
[硕博家园] 申博自荐 2篇一区TOP+1篇EI+2公开发明专利 2027博士申请 +3 小小阿光 2026-10-27 3/150 2026-10-29 23:56 by 起风了的快乐
[文学芳草园] 闲聊 +3 myrtle 2026-10-25 6/300 2026-10-29 15:28 by myrtle
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭