24小时热门版块排行榜    

查看: 4542  |  回复: 34

nieqiantina

银虫 (初入文坛)

[求助] 请教,当扩出来的PCR产物很短(比如只有30bp)的时候,应该怎么办 已有14人参与

请教,当扩出来的PCR产物很短(比如只有30bp)的时候,应该怎么办
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

lifechuteng

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你是要合成吗?直接双引物退火就行了,不需要PCR
9楼2015-07-06 13:24:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nonglong1

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
短序列构建T载体后再测序

[ 发自小木虫客户端 ]
植物学
16楼2015-07-06 14:52:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ksws0465326

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
nieqiantina(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-07-08 09:24:57
你想干嘛?只是验证有没有的话,10%page 应该可以,如果要插入到载体质粒上,要看你选择什么方法,酶切连接,还是别的什么
6楼2015-07-06 10:55:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ksws0465326

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

30几bp直接测序是没办法,可以考虑将其导入到T载体里,然后再测序重组T载体即可,具体方法,你可以上网找一下takara官网应该有。
18楼2015-07-06 17:21:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nieqiantina

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
25楼: Originally posted by junhu886 at 2015-07-07 09:38:17
如果只是为了测序,可以扩增长一点,只要目的片段在里面就可以
如果只是为了P出目的片段,可以用特殊的PCR方法,分子克隆指南上应该有

扩增长一点是设计引物时把模板增加吗,还是其他什么办法,请指教
29楼2015-07-07 11:14:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

nieqiantina

银虫 (初入文坛)

2楼2015-07-06 09:16:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nieqiantina

银虫 (初入文坛)

有哪位大神知道,帮帮忙
3楼2015-07-06 09:21:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nieqiantina

银虫 (初入文坛)

求大神指导
4楼2015-07-06 09:30:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nieqiantina

银虫 (初入文坛)

等等等等等等等等等等等等等等等等
5楼2015-07-06 09:52:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nieqiantina

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by ksws0465326 at 2015-07-06 10:55:01
你想干嘛?只是验证有没有的话,10%page 应该可以,如果要插入到载体质粒上,要看你选择什么方法,酶切连接,还是别的什么

就是为了测序,可是片段太短,测不出来
7楼2015-07-06 11:19:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiqinger

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
那是目的条带吗?不会是引物二聚体吧。
123456
8楼2015-07-06 13:02:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huangglen

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
nieqiantina(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-07-08 09:25:07
楼主预期产物是这么大吗?如果是预期比较大的产物,电泳跑出这样的位置,那可能是引物二聚体,pcr未成功扩增

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
10楼2015-07-06 14:12:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 nieqiantina 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +5 zju2000 2026-08-16 5/250 2026-08-16 23:23 by Haru815
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +32 医学老男孩 2026-08-13 74/3700 2026-08-16 21:05 by 医学老男孩
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +3 Tide man 2026-08-14 3/150 2026-08-16 17:47 by jurkat.1640
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 26/1300 2026-08-16 12:35 by 启萌科技
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +11 家与远方 2026-08-10 16/800 2026-08-16 10:28 by ray43
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +10 majunge000 2026-08-11 12/600 2026-08-16 08:18 by xli1984
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
信息提示
请填处理意见