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slwr

铜虫 (小有名气)

[求助] 液相色谱出峰问题 已有2人参与

初作液相色谱,将真菌和放线菌发酵液中的代谢物进行分离,相关参数为:流动相60%甲醇等浓度洗脱,检测器245nm, 流速5 ml/min. 峰图如下:
请教各位高手,如何使图中的几个峰分开?形成比较尖的峰?

液相色谱出峰问题
1.png
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lifucheng

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【答案】应助回帖

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slwr: 金币+10, ★★★很有帮助 2015-06-28 22:35:29
流速5 ml/min?流速那么大干什么? 如果楼主是5um柱子的话 用流速1ml/min就可以了 试试梯度喃 0-20min MeOH(30-70),另外,楼主用短柱子试试
2楼2015-06-28 13:23:09
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匿名

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3楼2015-06-28 13:41:26
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slwr

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lifucheng at 2015-06-28 13:23:09
流速5 ml/min?流速那么大干什么? 如果楼主是5um柱子的话 用流速1ml/min就可以了 试试梯度喃 0-20min MeOH(30-70),另外,楼主用短柱子试试

是大柱子,能进5 ml的制备柱,仪器不够高级,不能自动设置梯度洗脱。可以手动设几个梯度进行洗脱吗?短柱子是指进样量更小的柱子吗?实验室还有一个小柱。我的样品不多,而且制备也比较麻烦。我想请问这种情况主要是什么原因呢?
4楼2015-06-28 16:13:53
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slwr

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by lich666 at 2015-06-28 13:41:26
这是要制备么?把有机相调小点试试。

你的意思是有机相中甲醇的含量多,极性影响出峰,造成现在这种情况吗?
5楼2015-06-28 16:14:52
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匿名

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slwr: 金币+10, ★★★很有帮助 2015-06-28 22:33:51
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6楼2015-06-28 16:32:29
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lifucheng

专家顾问 (知名作家)

引用回帖:
4楼: Originally posted by slwr at 2015-06-28 16:13:53
是大柱子,能进5 ml的制备柱,仪器不够高级,不能自动设置梯度洗脱。可以手动设几个梯度进行洗脱吗?短柱子是指进样量更小的柱子吗?实验室还有一个小柱。我的样品不多,而且制备也比较麻烦。我想请问这种情况主要 ...

如果是制备柱的话 考虑减小有机相比例试试
7楼2015-06-28 16:42:32
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slwr

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by lifucheng at 2015-06-28 16:42:32
如果是制备柱的话 考虑减小有机相比例试试...

多谢多谢!我试试!
8楼2015-06-28 22:32:12
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slwr

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by lich666 at 2015-06-28 16:32:29
看你这个像大柱子,把有机相减一减,让保留时间长一些,看看能不能提高分离效果。...

多谢指教,我试试!
9楼2015-06-28 22:33:28
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