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zzymjp

铁杆木虫 (正式写手)

[求助] 蛋白质变性的问题 已有2人参与

多大浓度的SDS、尿素、盐酸胍可以使蛋白质(BSA)变性,资料上查到是6M/L,是变性剂的最终浓度吗?
如果加重金属盐或者强酸强碱,多大浓度合适?
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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
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zzymjp: 金币+5 2015-07-22 21:45:04
这个应该没有确定的值,不同蛋白对pH值、金属、酸碱、变性剂的敏感性不一样。对于特定的蛋白,变性条件只能通过实验确定。
2楼2015-06-24 22:23:17
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zzymjp

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by stone2239 at 2015-06-24 22:23:17
这个应该没有确定的值,不同蛋白对pH值、金属、酸碱、变性剂的敏感性不一样。对于特定的蛋白,变性条件只能通过实验确定。

如果仅仅是BSA呢~~
3楼2015-06-25 00:37:22
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calorimetry

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zzymjp: 金币+5 2015-07-22 21:45:00
盐酸胍一般都是6M;尿素用8M;SDS没有确定浓度,一般每1克蛋白质结合1.4克SDS,SDS的量可以稍微大些,一般浓度可以参考SDS PAGE电泳时的SDS浓度。这三种变性剂变性的蛋白质一般可以复性。

重金属盐或者强酸强碱不好说固定的计量,一般也不要用,因为重金属盐或者强酸强碱引起的蛋白质变性很难复性,如果不是不可能复性的话。
4楼2015-06-25 09:01:51
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