| 查看: 5774 | 回复: 6 | |||
[求助]
BiFC只能验证蛋白的直接互作吗已有2人参与
|
| BiFC实验结果两个蛋白有互作，但酵母双杂交不互作，求解！？ |
回复此楼» 猜你喜欢
为什么蛋白质氨基酸测定大家都测17种?
已经有5人回复
-
《灰分记：我与坩埚的“灰烬”之恋》
已经有3人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有144人回复
-
求助 食品检验工（基础知识），中国劳动社会出版社 电子版
已经有5人回复
-
胶体几丁质的结晶度？
已经有0人回复
-
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士
已经有2人回复
-
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线
已经有5人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
做蛋白质互作的有没有啊
已经有10人回复- 做一次蛋白互作需要多少钱？
已经有7人回复
- 蛋白质相互作用研究 蛋白A能pull-down蛋白B 反之检测不出
已经有22人回复
- 酵母cDNA文库筛选与目的蛋白相互作用蛋白的几个问题
已经有3人回复
- 求助预测目的蛋白与某一蛋白相互作用位点使用什么软件或在线工具啊？
已经有10人回复
- APG-1387新药据说是基于“蛋白-蛋白相互作用”的小分子细胞毒类抗肿瘤药。
已经有10人回复
- 拟南芥蛋白互作非特异条带怎么解决？
已经有7人回复
- 求pull-down筛选互作蛋白
已经有4人回复
- 除了酵母双杂交技术 还有没有别的方法可以筛选互作蛋白的
已经有14人回复
- 酵母双杂找出目的蛋白的互作蛋白后进一步实验该做什么？求教！
已经有5人回复
- 胞外蛋白质相互作用的方法
已经有17人回复
- 高分子蛋白质之间相互作用，熵焓变问题。求深入讨论。
已经有7人回复
- 求教蛋白与基因相互作用研究方法有哪些
已经有6人回复
- 开发了一个用于预测蛋白互作的软件，请问投什么期刊，谢谢！
已经有11人回复
- 蛋白质之间相互作用的研究方法有哪些？
已经有3人回复
- 圆二色谱对分析蛋白质相互作用有帮助吗
已经有5人回复
- 【求助】如何探究两个蛋白质之间的直接或间接相互作用？谢谢！
已经有6人回复
- 分享膜蛋白相互作用检测法：mating-based Split-Ubiquitin System
已经有30人回复
- 蛋白质与蛋白质互作研究方法
已经有495人回复
- 如何验证RNA是否与蛋白质发生相互作用？
已经有8人回复
- 蛋白互作必会，GST纯化遇到的问题
已经有13人回复
- 【求助/交流】有没有可以在细胞中定位的荧光蛋白
已经有9人回复
- 【求助/交流】荧光双分子互补技术
已经有4人回复
starseacow
专家顾问 (职业作家)
-
专家经验: +426 - MolEPI: 3
- 应助: 1217 (讲师)
- 金币: 9097.3
- 散金: 16445
- 红花: 226
- 帖子: 4669
- 在线: 2320.2小时
- 虫号: 1136974
- 注册: 2010-11-02
- 性别: GG
- 专业: 植物生理与生化
- 管辖: 动植物
2楼2015-06-10 15:52:37
3楼2015-06-10 19:08:59
calorimetry
铜虫 (正式写手)
- 应助: 51 (初中生)
- 金币: 126.8
- 红花: 13
- 帖子: 569
- 在线: 36.5小时
- 虫号: 3901654
- 注册: 2015-06-01
- 性别: MM
- 专业: 生物大分子结构与功能
【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
|
BiFC阳性能够说明说明是两个蛋白直接互作！ 双分子荧光互补技术BiFC（Bimolecular Fluorescence Complementation） 是将荧光报告蛋白按照规则分成没有荧光的两段，分别与诱饵蛋白和捕获蛋白融合，只有在诱饵蛋白和捕获蛋白发生相互作用的情况下，两段不完整的荧光报告蛋白才会形成完整的报告蛋白，发出荧光。活细胞收集后，在流式细胞仪中的检测是实时进行的，只要细胞中有荧光产生就会被捕捉到信号，因此，不论是亲和力较弱的结合还是暂时性的结合都不会被遗漏。 这是一种比较新型的蛋白质相互作用检测技术，理论上讲，可能在一些时候可以比酵母双杂交更灵敏，但是无论是双分子荧光还是酵母双杂交，都涉及到一个融合蛋白的构像改变的问题，如果与荧光报道基因的两个分割部分或者转录因子的两个分割部分中两者或者另种实验方法中的报告蛋白质的两部分任何之一发生剧烈的构想变化，那么可能能够相互作用的被检测的两种蛋白质的标记者却无法形成有功能的报告蛋白质结构，那么实验结果就无法显示出阳性。而蛋白质的折叠是一种很复杂的过程，没有任何一种理论能够概括出所有已知的蛋白质的折叠过程和折叠结果，而且有些蛋白质也不是只有一种折叠路径，甚至不止一种稳定的折叠结果。 所以楼主因该多用一些蛋白质相互作用的研究方法，具体研究方法请见： Haian Fu edits ,Protein-Protein Interactions,Humana Press,2004（唯一完整版） http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=7764403 此书是我在米国的师姐发的。 |
4楼2015-06-12 15:53:25
calorimetry
铜虫 (正式写手)
- 应助: 51 (初中生)
- 金币: 126.8
- 红花: 13
- 帖子: 569
- 在线: 36.5小时
- 虫号: 3901654
- 注册: 2015-06-01
- 性别: MM
- 专业: 生物大分子结构与功能
5楼2015-06-12 15:54:21
calorimetry
铜虫 (正式写手)
- 应助: 51 (初中生)
- 金币: 126.8
- 红花: 13
- 帖子: 569
- 在线: 36.5小时
- 虫号: 3901654
- 注册: 2015-06-01
- 性别: MM
- 专业: 生物大分子结构与功能
6楼2015-06-12 16:19:30
calorimetry
铜虫 (正式写手)
- 应助: 51 (初中生)
- 金币: 126.8
- 红花: 13
- 帖子: 569
- 在线: 36.5小时
- 虫号: 3901654
- 注册: 2015-06-01
- 性别: MM
- 专业: 生物大分子结构与功能
7楼2015-06-12 16:20:47