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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 粮油与蛋白 » 淀粉消化性能测试
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月夜啸狼

至尊木虫 (著名写手)

[求助] 淀粉消化性能测试 已有1人参与

哪位大侠分享下淀粉消化性能测试怎么样做《称取200 mg 淀粉样品置于测试管中，添加15 mL pH 5.2的0.2 mol/L醋酸钠缓冲液，混匀后加入10 mL的猪胰α-淀粉酶（290 U/mL）和糖化酶（15 U/mL），置于37 ℃恒温水浴下振荡（转速为150 r/min）并准确计时。水解20或120min 后取出0.5 mL水解液加4 mL无水乙醇灭酶，用DNS法测其葡萄糖含量。样品中快消化淀粉( RDS ) 、慢消化淀粉( SDS ) 、抗消化淀粉( RS ) 的质量分数具体计算公式如下：
RDS（%）＝（G20－FG）×0.9／TS
SDS（%）＝（G120－G20）×0.9／TS
RS（%）＝[TS－（RDS＋SDS）] ／TS
式中：G20—淀粉酶水解20 min后产生的葡萄糖含量(mg)；
G120—淀粉酶水解120 min后产生的葡萄糖含量(mg)；
FG—酶水解处理前淀粉中游离葡萄糖含量(mg)；
TS—样品中总淀粉含量(mg)。
》游离葡萄糖含量怎么样测试？还有
能给点详细步骤也行，非常感谢
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只要路是对的，就不怕路远
1楼 2015-05-26 09:57:47
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

没落的城堡

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 月夜啸狼 at 2015-05-26 14:27:12
您的意思是测试G20、G120、FG都是用把所有的水解液离心吗？...

恩，是的。所以最后很不好计算。只是G20、G120、FG重复性很好，最后只能根据自己想要的来选择。
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5楼2015-05-26 18:48:45
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普通回帖

没落的城堡

铁虫 (初入文坛)
你的样品是什么，具体哪一步不太会？我也是自己琢磨的
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2楼2015-05-26 11:46:31
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没落的城堡

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
月夜啸狼: 金币+15, ★★★很有帮助 2015-05-26 21:09:45
sytucom: 金币+2, 回帖精彩，谢谢参与 2015-08-19 19:44:05
我也看到很多采用这种方法的，但是做实验时存在一些问题。1、如果直接取0.5mL水解液，水解液里会有淀粉沉淀，DNS测定时会有影响，而影响最后的测定结果，所以需要加一个离心环节；水解液是不均一的，只取0.5mL来做平行，结果很不理想，我就直接把所有的水解液直接离心，离心后定容到容量瓶中，吸取1mL待DNS测定。2、此实验需要做一个DNS标曲。我的方法也仅供参考，但是结果计算的时候会很麻烦。
精确称取100mg(分别记为M1和M2)样品于100mL锥形瓶中，加入pH5.2的醋酸缓冲液10mL，在37℃水浴锅中平衡10min，加入4mL猪胰酶和1mL糖化酶（2500U/mL），以200r/min的转速摇动，计时。分别在20min和120min取出，煮沸5min灭酶。转移至离心管中3500rpm，离心10min。再重复离心一次，将上清液转移到100mL容量瓶中，定容。最后取1mL用DNS法测还原糖含量。每个样品重复3次。
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3楼2015-05-26 12:04:11
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月夜啸狼

至尊木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 没落的城堡 at 2015-05-26 12:04:11
我也看到很多采用这种方法的，但是做实验时存在一些问题。1、如果直接取0.5mL水解液，水解液里会有淀粉沉淀，DNS测定时会有影响，而影响最后的测定结果，所以需要加一个离心环节；水解液是不均一的，只取0.5mL来做平 ...

您的意思是测试G20、G120、FG都是用把所有的水解液离心吗？
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只要路是对的，就不怕路远
4楼2015-05-26 14:27:12
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shashi126

木虫 (正式写手)

麦场前的大槐树
??
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6楼2015-06-01 12:42:09
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食品学生小明

银虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 没落的城堡 at 2015-05-26 18:48:45
恩，是的。所以最后很不好计算。只是G20、G120、FG重复性很好，最后只能根据自己想要的来选择。...

你好！我看到一些文献测定慢消化淀粉前，需要在沸水加热30分钟预糊化。我用的是纯玉米淀粉，需不需要进行加热处理？请老师指点。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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书山有路勤为径，学海无涯苦作舟。
7楼2015-08-19 10:09:01
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月夜啸狼

至尊木虫 (著名写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 食品学生小明 at 2015-08-19 10:09:01
你好！我看到一些文献测定慢消化淀粉前，需要在沸水加热30分钟预糊化。我用的是纯玉米淀粉，需不需要进行加热处理？请老师指点。
...

制备慢消化淀粉的时候是沸水浴30分钟充分糊化，糊化的时候需要不停的搅拌。测试慢消化淀粉的时候，在没有加酶的时候需要预糊化，用于测试样品中游离的葡萄糖，只不过我这边做的预糊化没有你说的那么久，我就糊化10分钟。测试游离葡萄糖后冷却到测试慢消化淀粉温度的时候再加入酶对其进行水解。不知道适不适合你，你可以参考下，然后再多查阅相关资料看下
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只要路是对的，就不怕路远
8楼2015-08-19 19:37:43
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食品学生小明

银虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 月夜啸狼 at 2015-08-19 19:37:43
制备慢消化淀粉的时候是沸水浴30分钟充分糊化，糊化的时候需要不停的搅拌。测试慢消化淀粉的时候，在没有加酶的时候需要预糊化，用于测试样品中游离的葡萄糖，只不过我这边做的预糊化没有你说的那么久，我就糊化10 ...

在试验中用α-淀粉酶（芽孢杆菌发酵提取物）代替猪胰α-淀粉酶，是否合理？请指点。
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书山有路勤为径，学海无涯苦作舟。
9楼2015-08-20 10:18:01
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月夜啸狼

至尊木虫 (著名写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 食品学生小明 at 2015-08-20 10:18:01
在试验中用α-淀粉酶（芽孢杆菌发酵提取物）代替猪胰α-淀粉酶，是否合理？请指点。...

猪胰a淀粉酶 是从动物的胰腺中提取出来的，一般的a淀粉酶不能模拟人体肠道内的环境下的消化淀粉的效果的  如果你的实验不是做IN-vitro的话影响应该不是很大  但是如果是IN -VITRO的话 应该是需要胰淀粉酶的。
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只要路是对的，就不怕路远
10楼2015-08-20 14:06:04
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