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月夜啸狼

至尊木虫 (著名写手)

[求助] 淀粉消化性能测试 已有1人参与

哪位大侠分享下淀粉消化性能测试怎么样做《称取200 mg 淀粉样品置于测试管中,添加15 mL pH 5.2的0.2 mol/L醋酸钠缓冲液,混匀后加入10 mL的猪胰α-淀粉酶(290 U/mL)和糖化酶(15 U/mL),置于37 ℃恒温水浴下振荡(转速为150 r/min)并准确计时。水解20或120min 后取出0.5 mL水解液加4 mL无水乙醇灭酶,用DNS法测其葡萄糖含量。样品中快消化淀粉( RDS ) 、慢消化淀粉( SDS ) 、抗消化淀粉( RS ) 的质量分数具体计算公式如下:
RDS(%)=(G20-FG)×0.9/TS
SDS(%)=(G120-G20)×0.9/TS
RS(%)=[TS-(RDS+SDS)] /TS
式中:G20—淀粉酶水解20 min后产生的葡萄糖含量(mg);
G120—淀粉酶水解120 min后产生的葡萄糖含量(mg);
FG—酶水解处理前淀粉中游离葡萄糖含量(mg);
TS—样品中总淀粉含量(mg)。
》游离葡萄糖含量怎么样测试?还有
能给点详细步骤也行,非常感谢
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月夜啸狼

至尊木虫 (著名写手)

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3楼: Originally posted by 没落的城堡 at 2015-05-26 12:04:11
我也看到很多采用这种方法的,但是做实验时存在一些问题。1、如果直接取0.5mL水解液,水解液里会有淀粉沉淀,DNS测定时会有影响,而影响最后的测定结果,所以需要加一个离心环节;水解液是不均一的,只取0.5mL来做平 ...

您的意思是测试G20、G120、FG都是用把所有的水解液离心吗?
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4楼2015-05-26 14:27:12
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月夜啸狼

至尊木虫 (著名写手)

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7楼: Originally posted by 食品学生小明 at 2015-08-19 10:09:01
你好!我看到一些文献测定慢消化淀粉前,需要在沸水加热30分钟预糊化。我用的是纯玉米淀粉,需不需要进行加热处理?请老师指点。
...

制备慢消化淀粉的时候是沸水浴30分钟充分糊化,糊化的时候需要不停的搅拌。测试慢消化淀粉的时候,在没有加酶的时候需要预糊化,用于测试样品中游离的葡萄糖,只不过我这边做的预糊化没有你说的那么久,我就糊化10分钟。测试游离葡萄糖后冷却到测试慢消化淀粉温度的时候再加入酶对其进行水解。不知道适不适合你,你可以参考下,然后再多查阅相关资料看下
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8楼2015-08-19 19:37:43
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月夜啸狼

至尊木虫 (著名写手)

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9楼: Originally posted by 食品学生小明 at 2015-08-20 10:18:01
在试验中用α-淀粉酶(芽孢杆菌发酵提取物)代替猪胰α-淀粉酶,是否合理?请指点。...

猪胰a淀粉酶 是从动物的胰腺中提取出来的,一般的a淀粉酶不能模拟人体肠道内的环境下的消化淀粉的效果的  如果你的实验不是做IN-vitro的话影响应该不是很大  但是如果是IN -VITRO的话 应该是需要胰淀粉酶的。
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10楼2015-08-20 14:06:04
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月夜啸狼

至尊木虫 (著名写手)

引用回帖:
12楼: Originally posted by 食品学生小明 at 2015-08-20 20:11:31
老师,你好!你的a淀粉酶和糖化酶是怎么配制的?我用的酶类都是粉末状的,用的是pH5.8醋酸钠缓冲液配制,但是总是出现沉淀和分层现象,后来进行离心处理,但是酶解活性很低。...

我的直接是用蒸馏水配的,两种酶配到一起的,还可以。没有离心过,你和前两天咨询我的一个同学一样说不溶解,然后她采用的是离心后取上清液的,我感觉这样处理酶活性多多少少都会降低的,因为酶没有溶解就离心,离心后的沉淀中还可能会有酶吧。我是这样理解的
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13楼2015-08-20 21:48:52
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月夜啸狼

至尊木虫 (著名写手)

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14楼: Originally posted by 食品学生小明 at 2015-08-21 00:19:43
确实。我也做过没有离心和离心对比,发现没有离心酶解效果会很好,因为溶液不均一,酶解效果有一定的差别。...

所以,你再查阅些相关材料,然后确定一个相对较好的方法,再试试
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15楼2015-08-21 01:44:03
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