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月夜啸狼

至尊木虫 (著名写手)

[求助] 淀粉消化性能测试 已有1人参与

哪位大侠分享下淀粉消化性能测试怎么样做《称取200 mg 淀粉样品置于测试管中,添加15 mL pH 5.2的0.2 mol/L醋酸钠缓冲液,混匀后加入10 mL的猪胰α-淀粉酶(290 U/mL)和糖化酶(15 U/mL),置于37 ℃恒温水浴下振荡(转速为150 r/min)并准确计时。水解20或120min 后取出0.5 mL水解液加4 mL无水乙醇灭酶,用DNS法测其葡萄糖含量。样品中快消化淀粉( RDS ) 、慢消化淀粉( SDS ) 、抗消化淀粉( RS ) 的质量分数具体计算公式如下:
RDS(%)=(G20-FG)×0.9/TS
SDS(%)=(G120-G20)×0.9/TS
RS(%)=[TS-(RDS+SDS)] /TS
式中:G20—淀粉酶水解20 min后产生的葡萄糖含量(mg);
G120—淀粉酶水解120 min后产生的葡萄糖含量(mg);
FG—酶水解处理前淀粉中游离葡萄糖含量(mg);
TS—样品中总淀粉含量(mg)。
》游离葡萄糖含量怎么样测试?还有
能给点详细步骤也行,非常感谢
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只要路是对的,就不怕路远
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没落的城堡

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
月夜啸狼: 金币+15, ★★★很有帮助 2015-05-26 21:09:45
sytucom: 金币+2, 回帖精彩,谢谢参与 2015-08-19 19:44:05
我也看到很多采用这种方法的,但是做实验时存在一些问题。1、如果直接取0.5mL水解液,水解液里会有淀粉沉淀,DNS测定时会有影响,而影响最后的测定结果,所以需要加一个离心环节;水解液是不均一的,只取0.5mL来做平行,结果很不理想,我就直接把所有的水解液直接离心,离心后定容到容量瓶中,吸取1mL待DNS测定。2、此实验需要做一个DNS标曲。我的方法也仅供参考,但是结果计算的时候会很麻烦。
精确称取100mg(分别记为M1和M2)样品于100mL锥形瓶中,加入pH5.2的醋酸缓冲液10mL,在37℃水浴锅中平衡10min,加入4mL猪胰酶和1mL糖化酶(2500U/mL),以200r/min的转速摇动,计时。分别在20min和120min取出,煮沸5min灭酶。转移至离心管中3500rpm,离心10min。再重复离心一次,将上清液转移到100mL容量瓶中,定容。最后取1mL用DNS法测还原糖含量。每个样品重复3次。
3楼2015-05-26 12:04:11
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没落的城堡

铁虫 (初入文坛)

你的样品是什么,具体哪一步不太会?我也是自己琢磨的
2楼2015-05-26 11:46:31
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月夜啸狼

至尊木虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 没落的城堡 at 2015-05-26 12:04:11
我也看到很多采用这种方法的,但是做实验时存在一些问题。1、如果直接取0.5mL水解液,水解液里会有淀粉沉淀,DNS测定时会有影响,而影响最后的测定结果,所以需要加一个离心环节;水解液是不均一的,只取0.5mL来做平 ...

您的意思是测试G20、G120、FG都是用把所有的水解液离心吗?
只要路是对的,就不怕路远
4楼2015-05-26 14:27:12
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没落的城堡

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 月夜啸狼 at 2015-05-26 14:27:12
您的意思是测试G20、G120、FG都是用把所有的水解液离心吗?...

恩,是的。所以最后很不好计算。只是G20、G120、FG重复性很好,最后只能根据自己想要的来选择。
5楼2015-05-26 18:48:45
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