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毛毛柔

新虫 (初入文坛)

[求助] DNS法测还原糖已有2人参与

我是新手求帮助!第一次接触这方面没人请教,各位大侠给点指导,不要笑话我。首先DNS法测多糖,做了好多次都做不出标准曲线,不知道什么原因?还有哪位有数据可以借我参考一下吗,万分感谢!
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青若

至尊木虫 (文坛精英)

★ ★ ★ ★ ★
毛毛柔(fatewu代发): 金币+3 2015-05-23 17:35:28
fatewu: 金币+2, 欢迎常来无机物化版交流~ 2015-05-23 17:35:52
引用回帖:
5楼: Originally posted by 毛毛柔 at 2015-05-15 16:36:22
总糖比还原糖的吸光度值要低,很纳闷...

如果只是标曲不好的话可以考虑是葡萄糖溶液的问题,都不好的话影响最大的就是DNS的配制了
落霞与孤鹜齐飞,秋水共长天一色。
6楼2015-05-15 17:58:36
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青若

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
fatewu: 金币+1, 谢谢回帖,欢迎常来无机物化版交流,辛苦了~ 2015-05-14 09:55:45
DNS测的是还原糖,不是多糖。DNS是否配置正确,操作步骤是什么?楼主这些都不说清楚,让人怎么解释呢?
落霞与孤鹜齐飞,秋水共长天一色。
2楼2015-05-13 17:10:13
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毛毛柔

新虫 (初入文坛)


fatewu: 金币+1, 鼓励相互交流~ 2015-05-23 17:36:08
引用回帖:
2楼: Originally posted by 青若 at 2015-05-13 17:10:13
DNS测的是还原糖,不是多糖。DNS是否配置正确,操作步骤是什么?楼主这些都不说清楚,让人怎么解释呢?

多糖不是总糖-还原糖吗,DNS配置是正确的,只是没有放置一周使用,不知道是否有影响,我是门外汉,应公司要求不得不做,所以有错的请多多担待,谢谢。
以下是我的操作步骤:1.制作葡萄糖标准曲线
取7支20ml具塞试管,分别加入1mg/ml的葡萄糖溶液(ml)2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2,蒸馏水(ml)2、1.8、1.6、1.4、1.2、1.0、0.8,DNS1.5ml,沸水浴加热5min,l冷却定容,加塞混匀,调波长540nm,用0号管调零点,测出1~6号管的吸光度值。
2.还原糖的提取
称取1g样品,放入100ml烧杯中,先加少量水调成糊状,然后加入50ml蒸馏水,搅匀置于50°水浴中保温20min,转移到离心管中离心取上清液在100ml容量瓶中定容,作为还原糖待测液。
3.总糖
称取1g样品放入三角瓶中,加15ml蒸馏水及10ml6MHCL,置沸水浴中加热水解30min,待冷却后加入1滴酚酞指示剂,用6mol/lNaOH中和至微红色,用水定容在100ml容量瓶中,混匀,取水解液过滤取10ml滤液,移入另一100ml容量瓶中定容,混匀,作为总糖待测液。
4.显色比色
取4支20ml具塞试管,7、8、9、10分别加入还原糖待测液1ml、1ml,总糖待测液1ml、1ml,蒸馏水待测液1ml,DNS1.5ml,加热5min冷却定容。
3楼2015-05-15 09:36:16
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青若

至尊木虫 (文坛精英)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 毛毛柔 at 2015-05-15 09:36:16
多糖不是总糖-还原糖吗,DNS配置是正确的,只是没有放置一周使用,不知道是否有影响,我是门外汉,应公司要求不得不做,所以有错的请多多担待,谢谢。
以下是我的操作步骤:1.制作葡萄糖标准曲线
取7支20ml具塞试 ...

操作上看不出有什么问题,我想问下,标准曲线做不出来,样品显色吸收是否正常?
落霞与孤鹜齐飞,秋水共长天一色。
4楼2015-05-15 10:22:59
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毛毛柔

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 青若 at 2015-05-15 10:22:59
操作上看不出有什么问题,我想问下,标准曲线做不出来,样品显色吸收是否正常?...

总糖比还原糖的吸光度值要低,很纳闷
5楼2015-05-15 16:36:22
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毛毛柔

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 青若 at 2015-05-15 17:58:36
如果只是标曲不好的话可以考虑是葡萄糖溶液的问题,都不好的话影响最大的就是DNS的配制了...

我找到原因了,还是谢谢!!!
7楼2015-05-18 16:05:49
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forever2015

银虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 毛毛柔 at 2015-05-18 16:05:49
我找到原因了,还是谢谢!!!...

问一下,分别加入1mg/ml的葡萄糖溶液 0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2ml,蒸馏水2、1.8、1.6、1.4、1.2、1.0、0.8ml,DNS1.5ml,沸水浴加热5min,l冷却定容至15ml,加塞混匀,调波长540nm,用0号管调零点,测出1~6号管的吸光度值。
上述各管相对应的葡萄糖浓度是多少啊,看好多文献上写对应的浓度,分别是0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2mg\ml,是这样吗?后面加的蒸馏水为什么没考虑在内??
期待你的回复,谢谢啦
8楼2015-08-07 16:43:36
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20084071004

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by forever2015 at 2015-08-07 16:43:36
问一下,分别加入1mg/ml的葡萄糖溶液 0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2ml,蒸馏水2、1.8、1.6、1.4、1.2、1.0、0.8ml,DNS1.5ml,沸水浴加热5min,l冷却定容至15ml,加塞混匀,调波长540nm,用0号管调零点,测出1~6号 ...

0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2mg/ml中的单位不是mg/ml,应该是mg,意思是这么多体积的液体里含有0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2mg的葡萄糖
9楼2015-08-14 23:24:27
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forever2015

银虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 20084071004 at 2015-08-14 23:24:27
0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2mg/ml中的单位不是mg/ml,应该是mg,意思是这么多体积的液体里含有0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2mg的葡萄糖...

谢谢你
10楼2015-08-17 10:44:06
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