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| 我是新手求帮助!第一次接触这方面没人请教,各位大侠给点指导,不要笑话我。首先DNS法测多糖,做了好多次都做不出标准曲线,不知道什么原因?还有哪位有数据可以借我参考一下吗,万分感谢! |
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fatewu: 金币+1, 鼓励相互交流~ 2015-05-23 17:36:08
fatewu: 金币+1, 鼓励相互交流~ 2015-05-23 17:36:08
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多糖不是总糖-还原糖吗,DNS配置是正确的,只是没有放置一周使用,不知道是否有影响,我是门外汉,应公司要求不得不做,所以有错的请多多担待,谢谢。 以下是我的操作步骤:1.制作葡萄糖标准曲线 取7支20ml具塞试管,分别加入1mg/ml的葡萄糖溶液(ml)2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2,蒸馏水(ml)2、1.8、1.6、1.4、1.2、1.0、0.8,DNS1.5ml,沸水浴加热5min,l冷却定容,加塞混匀,调波长540nm,用0号管调零点,测出1~6号管的吸光度值。 2.还原糖的提取 称取1g样品,放入100ml烧杯中,先加少量水调成糊状,然后加入50ml蒸馏水,搅匀置于50°水浴中保温20min,转移到离心管中离心取上清液在100ml容量瓶中定容,作为还原糖待测液。 3.总糖 称取1g样品放入三角瓶中,加15ml蒸馏水及10ml6MHCL,置沸水浴中加热水解30min,待冷却后加入1滴酚酞指示剂,用6mol/lNaOH中和至微红色,用水定容在100ml容量瓶中,混匀,取水解液过滤取10ml滤液,移入另一100ml容量瓶中定容,混匀,作为总糖待测液。 4.显色比色 取4支20ml具塞试管,7、8、9、10分别加入还原糖待测液1ml、1ml,总糖待测液1ml、1ml,蒸馏水待测液1ml,DNS1.5ml,加热5min冷却定容。 |
3楼2015-05-15 09:36:16
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