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毛毛柔

新虫 (初入文坛)

[求助] DNS法测还原糖 已有2人参与

我是新手求帮助！第一次接触这方面没人请教，各位大侠给点指导，不要笑话我。首先DNS法测多糖，做了好多次都做不出标准曲线，不知道什么原因？还有哪位有数据可以借我参考一下吗，万分感谢！
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1楼 2015-05-13 15:56:53
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

青若

至尊木虫 (文坛精英)
★ ★ ★ ★ ★
毛毛柔(fatewu代发): 金币+3 2015-05-23 17:35:28
fatewu: 金币+2, 欢迎常来无机物化版交流~ 2015-05-23 17:35:52
引用回帖:
5楼: Originally posted by 毛毛柔 at 2015-05-15 16:36:22
总糖比还原糖的吸光度值要低，很纳闷...

如果只是标曲不好的话可以考虑是葡萄糖溶液的问题，都不好的话影响最大的就是DNS的配制了
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落霞与孤鹜齐飞，秋水共长天一色。
6楼2015-05-15 17:58:36
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普通回帖

青若

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
fatewu: 金币+1, 谢谢回帖，欢迎常来无机物化版交流，辛苦了~ 2015-05-14 09:55:45
DNS测的是还原糖，不是多糖。DNS是否配置正确，操作步骤是什么？楼主这些都不说清楚，让人怎么解释呢？
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落霞与孤鹜齐飞，秋水共长天一色。
2楼2015-05-13 17:10:13
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毛毛柔

新虫 (初入文坛)
★
fatewu: 金币+1, 鼓励相互交流~ 2015-05-23 17:36:08
引用回帖:
2楼: Originally posted by 青若 at 2015-05-13 17:10:13
DNS测的是还原糖，不是多糖。DNS是否配置正确，操作步骤是什么？楼主这些都不说清楚，让人怎么解释呢？

多糖不是总糖-还原糖吗，DNS配置是正确的，只是没有放置一周使用，不知道是否有影响，我是门外汉，应公司要求不得不做，所以有错的请多多担待，谢谢。
以下是我的操作步骤：1.制作葡萄糖标准曲线
取7支20ml具塞试管，分别加入1mg/ml的葡萄糖溶液(ml)2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2，蒸馏水（ml）2、1.8、1.6、1.4、1.2、1.0、0.8，DNS1.5ml，沸水浴加热5min,l冷却定容,加塞混匀，调波长540nm,用0号管调零点，测出1~6号管的吸光度值。
2.还原糖的提取
称取1g样品，放入100ml烧杯中，先加少量水调成糊状，然后加入50ml蒸馏水，搅匀置于50°水浴中保温20min，转移到离心管中离心取上清液在100ml容量瓶中定容，作为还原糖待测液。
3.总糖
称取1g样品放入三角瓶中，加15ml蒸馏水及10ml6MHCL，置沸水浴中加热水解30min,待冷却后加入1滴酚酞指示剂，用6mol/lNaOH中和至微红色，用水定容在100ml容量瓶中，混匀，取水解液过滤取10ml滤液，移入另一100ml容量瓶中定容，混匀，作为总糖待测液。
4.显色比色
取4支20ml具塞试管，7、8、9、10分别加入还原糖待测液1ml、1ml，总糖待测液1ml、1ml,蒸馏水待测液1ml,DNS1.5ml,加热5min冷却定容。
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3楼2015-05-15 09:36:16
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青若

至尊木虫 (文坛精英)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 毛毛柔 at 2015-05-15 09:36:16
多糖不是总糖-还原糖吗，DNS配置是正确的，只是没有放置一周使用，不知道是否有影响，我是门外汉，应公司要求不得不做，所以有错的请多多担待，谢谢。
以下是我的操作步骤：1.制作葡萄糖标准曲线
取7支20ml具塞试 ...

操作上看不出有什么问题，我想问下，标准曲线做不出来，样品显色吸收是否正常？
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落霞与孤鹜齐飞，秋水共长天一色。
4楼2015-05-15 10:22:59
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毛毛柔

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 青若 at 2015-05-15 10:22:59
操作上看不出有什么问题，我想问下，标准曲线做不出来，样品显色吸收是否正常？...

总糖比还原糖的吸光度值要低，很纳闷
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5楼2015-05-15 16:36:22
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毛毛柔

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 青若 at 2015-05-15 17:58:36
如果只是标曲不好的话可以考虑是葡萄糖溶液的问题，都不好的话影响最大的就是DNS的配制了...

我找到原因了，还是谢谢！！！
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7楼2015-05-18 16:05:49
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forever2015

银虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 毛毛柔 at 2015-05-18 16:05:49
我找到原因了，还是谢谢！！！...

问一下，分别加入1mg/ml的葡萄糖溶液 0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2ml，蒸馏水2、1.8、1.6、1.4、1.2、1.0、0.8ml，DNS1.5ml，沸水浴加热5min,l冷却定容至15ml,加塞混匀，调波长540nm,用0号管调零点，测出1~6号管的吸光度值。
上述各管相对应的葡萄糖浓度是多少啊，看好多文献上写对应的浓度，分别是0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2mg\ml，是这样吗？后面加的蒸馏水为什么没考虑在内？？
期待你的回复，谢谢啦
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8楼2015-08-07 16:43:36
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20084071004

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by forever2015 at 2015-08-07 16:43:36
问一下，分别加入1mg/ml的葡萄糖溶液 0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2ml，蒸馏水2、1.8、1.6、1.4、1.2、1.0、0.8ml，DNS1.5ml，沸水浴加热5min,l冷却定容至15ml,加塞混匀，调波长540nm,用0号管调零点，测出1~6号 ...

0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2mg/ml中的单位不是mg/ml，应该是mg，意思是这么多体积的液体里含有0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2mg的葡萄糖
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9楼2015-08-14 23:24:27
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forever2015

银虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 20084071004 at 2015-08-14 23:24:27
0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2mg/ml中的单位不是mg/ml，应该是mg，意思是这么多体积的液体里含有0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2mg的葡萄糖...

谢谢你
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10楼2015-08-17 10:44:06
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