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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】DNS试剂
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972973115

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】DNS试剂

DNS试剂配制必须按顺序加入吗？配制好必须放置一星期才能使用吗？可以一配制好就使用吗？
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1楼 2011-03-18 18:54:41
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starseacow

专家顾问 (职业作家)
★ ★
lstt09nk(金币+2): 感谢交流 2011-03-18 19:15:06
972973115(金币+5): 太谢谢你了，我用的是温水可以吗？ 2011-03-18 20:19:04
必须按顺序配，要水浴加热，但不能超过50度，先加3,5-二硝基水杨酸后加氢氧化钠，反过来有沉淀，配好需放置，立刻使用测得数据不准确（和放一周后测有很大不同，我试过）。
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2楼2011-03-18 19:09:42
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972973115

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by starseacow at 2011-03-18 19:09:42:
必须按顺序配，要水浴加热，但不能超过50度，先加3,5-二硝基水杨酸后加氢氧化钠，反过来有沉淀，配好需放置，立刻使用测得数据不准确（和放一周后测有很大不同，我试过）。

用温水可以吗？我加热搅拌对数据测定有影响吗？
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3楼2011-03-18 20:20:40
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daodi07

木虫 (著名写手)
★ ★
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amisking(金币+1): 鼓励发帖交流。 2011-03-18 20:47:40
加热的时候要不停的搅拌，温度在45℃左右比较合适，加水杨酸的时候要缓慢加入，边加边搅拌……
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4楼2011-03-18 20:34:38
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972973115

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by daodi07 at 2011-03-18 20:34:38:
加热的时候要不停的搅拌，温度在45℃左右比较合适，加水杨酸的时候要缓慢加入，边加边搅拌……

谢谢！！！！！！！！！！！！！！！！
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5楼2011-03-18 20:49:44
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
想那么复杂来干嘛，我以前回复过的帖子是哪张来着，那次回复得很详细的，明天去看看找不找得着。
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6楼2011-03-19 00:55:32
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972973115

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-03-19 00:55:32:
想那么复杂来干嘛，我以前回复过的帖子是哪张来着，那次回复得很详细的，明天去看看找不找得着。

太谢谢你了，我现在正做淀粉酶来 的，遇到好多问题，你用碘做过吗？
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7楼2011-03-19 14:09:01
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 972973115 at 2011-03-19 14:09:01:
太谢谢你了，我现在正做淀粉酶来 的，遇到好多问题，你用碘做过吗？

你误打误撞撞上我了，我用过碘液，你先说什么事情。还有你说的顺序是怎样的，配方是怎样的，方法是从哪篇文章或者书上得来的。

别人说的顺序，有没有说为什么要按照那个顺序来做？

[ Last edited by 冼亮淀粉酶 on 2011-3-19 at 16:49 ]
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8楼2011-03-19 16:08:18
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972973115

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-03-19 16:08:18:
你误打误撞撞上我了，我用过碘液，你先说什么事情。还有你说的顺序是怎样的，配方是怎样的，方法是从哪篇文章或者书上得来的。

别人说的顺序，有没有说为什么要按照那个顺序来做？

[ Last edited by 冼 ...

我用碘做，酶活很强，可是几乎每次都全部变黑，我是按照一篇论文做的，具体是哪一个我忘了，不过我总结了下步骤，1。取4毫升0.5%可溶性淀粉。2.取10毫升PH9.0氢氧化钠甘氨酸的缓冲液。3。70摄氏度保温10分钟。4。加2毫升粗酶液。5.反应10分钟。6.加入0.2摩尔每升盐酸终止反应。7.取4毫升反应液加入1毫升卢氏碘液
现在我想换DNS做还没开始，DNS配方是从一个论文上看到的
                不同DN S试剂测定木糖含量的研究
    工俊丽，聂国兴，曹香林，张建新，张朋飞
(河南师范大学生命科学学院，河南新乡453002)
摘要:刘一儿种小同配制方法配制的DNS  (3,5-硝基水杨酸)试剂测定木糖含量的效果进行研究。结果表明，除DNS3小适合测定木糖含量外，其它3种DNS试剂的测定效果均较好，其'I' DNS1在精密度、准确度和时间稳定性上均优于其它儿种DNS试剂，是DNS法测木糖含量时的首选显色试剂
关键词NS比色法;3, 5-硝基水杨酸;木糖
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9楼2011-03-20 16:19:39
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972973115

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-03-19 16:08:18:
你误打误撞撞上我了，我用过碘液，你先说什么事情。还有你说的顺序是怎样的，配方是怎样的，方法是从哪篇文章或者书上得来的。

别人说的顺序，有没有说为什么要按照那个顺序来做？

[ Last edited by 冼 ...

关于顺序我有提问，人说是”必须按顺序配，要水浴加热，但不能超过50度，先加3,5-二硝基水杨酸后加氢氧化钠，反过来有沉淀，配好需放置，立刻使用测得数据不准确（和放一周后测有很大不同，我试过）。 “
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10楼2011-03-20 16:23:14
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972973115

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-03-19 16:08:18:
你误打误撞撞上我了，我用过碘液，你先说什么事情。还有你说的顺序是怎样的，配方是怎样的，方法是从哪篇文章或者书上得来的。

别人说的顺序，有没有说为什么要按照那个顺序来做？

[ Last edited by 冼 ...

万分感谢啊！！！！！！！！！！希望能分享你的经验~~~~~~~~·现在还没做出来~~~~~~~~~~~~
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11楼2011-03-20 16:24:38
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

严正抗议小木虫论坛在引用帖时不能将被引用帖的全部文字内容引用！

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我用碘做，酶活很强，可是几乎每次都全部变黑，我是按照一篇论文做的，具体是哪一个我忘了，不过我总结了下步骤，1。取4毫升0.5%可溶性淀粉。2.取10毫升PH9.0氢氧化钠甘氨酸的缓冲液。3。70摄氏度保温10分钟。4。加2毫升粗酶液。5.反应10分钟。6.加入0.2摩尔每升盐酸终止反应。7.取4毫升反应液加入1毫升卢氏碘液


你怎么知道酶活力很强？

第六步，加多少毫升？

碘液浓度？

多少纳米比色？

淀粉跟碘结合很敏感的，你的0.5%作为底物浓度不算很高，但跟碘结合可能算很高了。

有没有移液枪？反应体积太大，机动性很差。

关于DNS法，由于在测定酶活力的时候是加到缓冲液里的，你给出的那篇木糖标准液没有用缓冲液来配置，所以我对结果是有点怀疑的。而且人家是测定木糖，木糖和麦芽糖不知道还原性是不是一样，所以还是找找测定麦芽糖的吧。
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12楼2011-03-21 10:05:51
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972973115

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-03-21 10:05:51:
我用碘做，酶活很强，可是几乎每次都全部变黑，我是按照一篇论文做的，具体是哪一个我忘了，不过我总结了下步骤，1。取4毫升0.5%可溶性淀粉。2.取10毫升PH9.0氢氧化钠甘氨酸的缓冲液。3。70摄氏度保温10分钟。4。 ...

酶活我是用固体平板做的，固体培养基里加了1%的可溶性淀粉，我这里还有图片你看下啊
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13楼2011-03-21 19:37:07
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972973115

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-03-21 10:05:51:
我用碘做，酶活很强，可是几乎每次都全部变黑，我是按照一篇论文做的，具体是哪一个我忘了，不过我总结了下步骤，1。取4毫升0.5%可溶性淀粉。2.取10毫升PH9.0氢氧化钠甘氨酸的缓冲液。3。70摄氏度保温10分钟。4。 ...

第六步盐酸终止液我加了四毫升
碘液浓度我用的是卢氏碘液，1克碘和2克碘化钾溶于300毫升去离子水中配置的。
我是在620纳米下测定吸光度的。
那关于底物的浓度，你以前做的用的是多少啊？
还有啊，你以前用的缓冲液是什么缓冲液啊？淀粉和碘结合，缓冲液的影响也很大，你有没有什么好的替代？
可以加你的Q吗？老师要我这个月底把这部分弄完，急啊~~~~~~~~~我Q就是我的小木虫帐号，期待你的回复！！！！！！！
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14楼2011-03-21 20:08:07
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hqq716

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我也要尝试下DNS法测还原糖，学习经验中。。。
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15楼2011-04-11 16:30:45
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zhigao211

禁虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
本帖内容被屏蔽
16楼2011-11-04 19:40:17
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fanxiaojuan

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
796021楼: Originally posted by starseacow at 2011-03-18 19:09:42:
必须按顺序配，要水浴加热，但不能超过50度，先加3,5-二硝基水杨酸后加氢氧化钠，反过来有沉淀，配好需放置，立刻使用测得数据不准确（和放一周后测有很大不同，我试过）。

温度为甚么不能超过50啊，我配的试剂水杨酸有很多不溶解，有什么办法吗？
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17楼2012-04-16 17:18:59
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wangqing0620

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
最好温度别太高，水杨酸溶于温热水中，加入时缓慢并不断搅拌，全部加完后再加氢氧化钠，否则两个一起加或者顺序反了会出现蛋花状的难溶物。
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18楼2013-07-08 08:39:54
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ztl890306

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
16楼: Originally posted by zhigao211 at 2011-11-04 19:40:17
才看到 这么多注意事项...
我昨天配的 把水杨酸加到NaOH溶液了 结果有沉淀 而后貌似水温有高了  沉淀等到凉下来又溶解了  敢问高手们 会不会对数据有影响呢？
难道我还要做个DNS试验了 呵呵

前辈，你的DNS配方是哪个能给我发一份吗？我用来测还原糖，配方太多都搞晕了，万谢啊
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19楼2013-08-24 17:14:46
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