| 查看: 983 | 回复: 5 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
SSR预实验荧光带不上 已有2人参与
|
||
| 如题，SSR的预实验已经做了很久，荧光基团总是加不到目的片段上，而是加在二聚体或者其他杂带上，20ul和10ul体系都能P出来，用的酶是天根的TAQ MIX，引物部分试过三种都失败了，其他水和DNA的比例问题不大。1），F引物：M13F引物：修饰基团：R引物=2：3：5：10。2），F引物：M13F引物：修饰基团：R引物=0.5:0.5:9:10。这种荧光加在目的片段上一点点，峰极低，几乎看不见。3），用了两轮，第一轮，M13F引物：R=1:1。第一轮产物用作第二轮模板，第二轮引物比例为，修饰基团：R引物=1:1。峰还是很低，要么就是依然加在比较短的杂带上。最后想看看正常情况到底应该什么样，就合了一条直接把修饰基团加在F引物上的引物，这次确实加到了目的片段上，但是这种方法太贵了，预实验的话会远超预算，只有预实验先做好了正式实验再用，所以请大神们帮我看看怎样能把这个预实验部分做出来，谢了！ |
回复此楼» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有119人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 实验上如何区分荧光材料和磷光材料
已经有3人回复
- 求助～花粉管荧光实验～
已经有26人回复
- 求助荧光纳米颗粒标记免疫分析实验 谢谢
已经有8人回复
- 彗星实验,荧光显微镜下找不到DNA是怎么回事
已经有14人回复
- 荧光定量PCR实验技术
已经有15人回复
- 间接免疫荧光法检测细菌的实验步骤
已经有1人回复
- ZBLAN：Er离子2H11/2及其一下能级的荧光寿命数据，是实验测出的荧光寿命！
已经有28人回复
- 多重荧光标记实验中，如何选择荧光染料
已经有10人回复
- 求助 SSR实验技术
已经有14人回复
- 有木有人做毛细管电泳荧光检测SSR标记的啊~~
已经有18人回复
- 请教下实验室怎么让荧光粉较好的粘接在陶瓷片（玻璃板）上面
已经有7人回复
- 【求助/交流】荧光原位杂交实验技术
已经有13人回复
- 【分享】荧光定量PCR实验指南（二）
已经有12人回复
5楼2015-05-12 14:13:14
2楼2015-05-11 15:05:53
yingheqian
金虫 (著名写手)
- 应助: 584 (博士)
- 金币: 562.6
- 散金: 1899
- 红花: 32
- 帖子: 2063
- 在线: 283.4小时
- 虫号: 3744032
- 注册: 2015-03-17
- 性别: GG
- 专业: 养蚕学
3楼2015-05-11 20:16:12
吾小豆123
金虫 (初入文坛)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 584
- 散金: 50
- 帖子: 38
- 在线: 106.2小时
- 虫号: 1995847
- 注册: 2012-09-12
- 性别: GG
- 专业: 原子和分子物理
4楼2015-05-11 21:43:21
投票:
30