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tianchongmy铁杆木虫 (著名写手)
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[求助]
免疫共沉淀求助，急！
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最近做免疫共沉淀，遇到很奇怪的问题，做A和B两个蛋白的互作，A蛋白38KD，B蛋白70KD，用A蛋白拉B蛋白时本来感觉没拉出来，出现一片黑带（左图下），而用B蛋白拉A蛋白时，应该是拉出来了（右图上），但我习惯在用抗体拉蛋白后也做个抗体对应的蛋白的western，想看下beads和抗体是否work，用A蛋白拉的时候，A蛋白的western正常（左图上），但用B蛋白拉的时候我发现B蛋白自己的western也是一片黑，我也用低浓度试过，条带浅一些但还是一片，所以想请教下大家这是怎么回事，可以改善吗，这种情况是不是说明A蛋白拉B蛋白时也不算没拉出来呢？多谢！ 00001.jpg |
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