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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于染色质免疫共沉淀技术不太懂得两个问题
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yghboy168

银虫 (小有名气)

[求助] 关于染色质免疫共沉淀技术不太懂得两个问题

1.染色质免疫共沉淀可以用于原核细菌吗？
2。用于沉淀的特异性抗体如何获得？
希望有经验的同仁指教！
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眼内有尘三界窄，心头无事一床宽！
1楼 2013-11-05 09:13:48
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woai43

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-11-05 11:57:19
1、染色质免疫共沉淀实验是用于检测某一蛋白与DNA的结合情况，从原理上讲是可以检测原核细菌的。问题是是否存在针对你感兴趣原核细菌蛋白的抗体？
2、针对细菌蛋白的抗体市面上不多吧，可以尝试自己制备。将感兴趣的细菌蛋白进行分子克隆并纯化蛋白，再免疫兔子或者小鼠。现在有很多公司提供定制抗体服务，你可以咨询一下。
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2楼2013-11-05 09:27:27
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普通回帖

沙门小rna

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-11-06 16:46:40
1可以的。我们在做。
2你可以在细菌蛋白上加个标签。用标签抗体做这个实验，不用制备特定单抗。明白？
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yghboy168
应助之星就是我~没错。你没有看错~
3楼2013-11-05 12:40:29
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yghboy168

银虫 (小有名气)
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引用回帖:
3楼: Originally posted by 沙门小rna at 2013-11-05 12:40:29
1可以的。我们在做。
2你可以在细菌蛋白上加个标签。用标签抗体做这个实验，不用制备特定单抗。明白？

太感谢了，以后还要您多多指教！
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yghboy168
眼内有尘三界窄，心头无事一床宽！
4楼2013-11-06 16:40:08
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yghboy168

银虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by yghboy168 at 2013-11-06 16:40:08
太感谢了，以后还要您多多指教！...

您可以把蛋白加标签做抗体的详细实验步骤发给我吗？我想做这方面的研究，不甚感激！
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眼内有尘三界窄，心头无事一床宽！
5楼2013-11-06 16:43:59
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farmer@

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 沙门小rna at 2013-11-05 12:40:29
1可以的。我们在做。
2你可以在细菌蛋白上加个标签。用标签抗体做这个实验，不用制备特定单抗。明白？

请问你结果做的怎么样呢？我最近也在做chip。结果一直不理想。不知道能否交流交流，联系方式私信发给你~
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6楼2013-11-07 17:43:10
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胡乱走走2011

银虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 沙门小rna at 2013-11-05 12:40:29
1可以的。我们在做。
2你可以在细菌蛋白上加个标签。用标签抗体做这个实验，不用制备特定单抗。明白？

你好。关于在蛋白上加个标签，然后用标签抗体做这个实验，这种方法我也考虑过，但是如何在生物体内加标签啊？能否分享下你的方法。非常感谢。
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Things change, people grow.
7楼2014-03-28 09:19:49
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c_jade

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 胡乱走走2011 at 2014-03-28 09:19:49
你好。关于在蛋白上加个标签，然后用标签抗体做这个实验，这种方法我也考虑过，但是如何在生物体内加标签啊？能否分享下你的方法。非常感谢。...

蛋白加标签，是指外源表达。不是直接在生物体内加标签
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8楼2014-03-28 11:05:39
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胡乱走走2011

银虫 (著名写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by c_jade at 2014-03-28 11:05:39
蛋白加标签，是指外源表达。不是直接在生物体内加标签...

我知道可以外源表达后加标签，但是据我的理解，细胞超声后，得到蛋白质和DNA复合体，然后用该蛋白质的特异性抗体，得到抗体-蛋白-DNA复合物，我不知道蛋白外源表达加上相应标签后，如何还能得到该靶蛋白-DNA？最近在查阅这方面信息，了解有限，还望多多指教？非常感谢。
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Things change, people grow.
9楼2014-03-29 10:40:19
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胡乱走走2011

银虫 (著名写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by yghboy168 at 2013-11-06 16:43:59
您可以把蛋白加标签做抗体的详细实验步骤发给我吗？我想做这方面的研究，不甚感激！...

请问你收到蛋白加标签做抗体的方法了吗？如果有，能否分享一下？非常感谢。
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Things change, people grow.
10楼2014-03-30 16:41:31
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