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yghboy168

银虫 (小有名气)

[求助] 关于染色质免疫共沉淀技术不太懂得两个问题

1.染色质免疫共沉淀可以用于原核细菌吗?
2。用于沉淀的特异性抗体如何获得?
希望有经验的同仁指教!
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woai43

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-11-05 11:57:19
1、染色质免疫共沉淀实验是用于检测某一蛋白与DNA的结合情况,从原理上讲是可以检测原核细菌的。问题是是否存在针对你感兴趣原核细菌蛋白的抗体?
2、针对细菌蛋白的抗体市面上不多吧,可以尝试自己制备。将感兴趣的细菌蛋白进行分子克隆并纯化蛋白,再免疫兔子或者小鼠。现在有很多公司提供定制抗体服务,你可以咨询一下。
2楼2013-11-05 09:27:27
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普通回帖

沙门小rna

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-11-06 16:46:40
1可以的。我们在做。
2你可以在细菌蛋白上加个标签。用标签抗体做这个实验,不用制备特定单抗。明白?

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

应助之星就是我~没错。你没有看错~
3楼2013-11-05 12:40:29
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yghboy168

银虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by 沙门小rna at 2013-11-05 12:40:29
1可以的。我们在做。
2你可以在细菌蛋白上加个标签。用标签抗体做这个实验,不用制备特定单抗。明白?

太感谢了,以后还要您多多指教!

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

眼内有尘三界窄,心头无事一床宽!
4楼2013-11-06 16:40:08
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yghboy168

银虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by yghboy168 at 2013-11-06 16:40:08
太感谢了,以后还要您多多指教!...

您可以把蛋白加标签做抗体的详细实验步骤发给我吗?我想做这方面的研究,不甚感激!
眼内有尘三界窄,心头无事一床宽!
5楼2013-11-06 16:43:59
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farmer@

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 沙门小rna at 2013-11-05 12:40:29
1可以的。我们在做。
2你可以在细菌蛋白上加个标签。用标签抗体做这个实验,不用制备特定单抗。明白?

请问你结果做的怎么样呢?我最近也在做chip。结果一直不理想。不知道能否交流交流,联系方式私信发给你~
6楼2013-11-07 17:43:10
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胡乱走走2011

银虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 沙门小rna at 2013-11-05 12:40:29
1可以的。我们在做。
2你可以在细菌蛋白上加个标签。用标签抗体做这个实验,不用制备特定单抗。明白?

你好。关于在蛋白上加个标签,然后用标签抗体做这个实验,这种方法我也考虑过,但是如何在生物体内加标签啊?能否分享下你的方法。非常感谢。
Things change, people grow.
7楼2014-03-28 09:19:49
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c_jade

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 胡乱走走2011 at 2014-03-28 09:19:49
你好。关于在蛋白上加个标签,然后用标签抗体做这个实验,这种方法我也考虑过,但是如何在生物体内加标签啊?能否分享下你的方法。非常感谢。...

蛋白加标签,是指外源表达。不是直接在生物体内加标签
8楼2014-03-28 11:05:39
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胡乱走走2011

银虫 (著名写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by c_jade at 2014-03-28 11:05:39
蛋白加标签,是指外源表达。不是直接在生物体内加标签...

我知道可以外源表达后加标签,但是据我的理解,细胞超声后,得到蛋白质和DNA复合体,然后用该蛋白质的特异性抗体,得到抗体-蛋白-DNA复合物,我不知道蛋白外源表达加上相应标签后,如何还能得到该靶蛋白-DNA?最近在查阅这方面信息,了解有限,还望多多指教?非常感谢。
Things change, people grow.
9楼2014-03-29 10:40:19
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胡乱走走2011

银虫 (著名写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by yghboy168 at 2013-11-06 16:43:59
您可以把蛋白加标签做抗体的详细实验步骤发给我吗?我想做这方面的研究,不甚感激!...

请问你收到蛋白加标签做抗体的方法了吗?如果有,能否分享一下?非常感谢。
Things change, people grow.
10楼2014-03-30 16:41:31
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