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tianchongmy

铁杆木虫 (著名写手)

[求助] 免疫共沉淀求助,急!

最近做免疫共沉淀,遇到很奇怪的问题,做A和B两个蛋白的互作,A蛋白38KD,B蛋白70KD,用A蛋白拉B蛋白时本来感觉没拉出来,出现一片黑带(左图下),而用B蛋白拉A蛋白时,应该是拉出来了(右图上),但我习惯在用抗体拉蛋白后也做个抗体对应的蛋白的western,想看下beads和抗体是否work,用A蛋白拉的时候,A蛋白的western正常(左图上),但用B蛋白拉的时候我发现B蛋白自己的western也是一片黑,我也用低浓度试过,条带浅一些但还是一片,所以想请教下大家这是怎么回事,可以改善吗,这种情况是不是说明A蛋白拉B蛋白时也不算没拉出来呢?多谢!

免疫共沉淀求助,急!
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