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小片段DNA双链 PCR合成 已有7人参与
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各位大神大家好，我最近在构建一个含有随机片段的DNA文库， 设计了一个GGCTAGTCGTACGATNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNCTGCATCTGCT的模板连， 和一小段引物CCGATCAGCATGCT，使用PCR扩增形成双链，我的条件是这样的 体系：模板5ug 引物15ug taq酶1ul dNTP 2ul 10x buffer，2ul 总体系100ul 反应条件：95℃、5min，50℃、5min，72℃10min， 结果感觉合成的双链较少（电泳结果单练多，双链少），回收达不到要求。而且电洗脱感觉效果也不行 请大家支支招 |
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Sunshine092
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3楼2015-04-21 21:12:25
fuyuandj86
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