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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 综合其他 » 关于overlap pcr 求助~~
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杨岩yer

金虫 (小有名气)

[求助] 关于overlap pcr 求助~~ 已有1人参与

把上下游的片段已经p出来了，重叠一直做不出来，连接不到一起，一直p出来1500bp的条带，目的条带是2000bp ，有谁知道可能是什么原因么？上下游1000bp左右，重叠有20几个bp~~求助啊
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1楼 2015-04-20 19:31:55
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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
杨岩yer: 金币+10, ★有帮助 2015-04-22 10:36:01
把1500bp的带先测个序分析下。
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2楼2015-04-20 21:42:22
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杨岩yer

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by stone2239 at 2015-04-20 21:42:22
把1500bp的带先测个序分析下。

大神知道有什么原因导致吗？
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3楼2015-04-20 23:26:01
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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

不知道，所以要测序，再根据结果来分析，我推测有可能两条序列除了你说的那20多个碱基外还有重叠片段，所以导致扩出的片段少了一段，只是推测，赶快测序吧，又快又便宜。
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4楼2015-04-21 00:43:24
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杨岩yer

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by stone2239 at 2015-04-21 00:43:24
不知道，所以要测序，再根据结果来分析，我推测有可能两条序列除了你说的那20多个碱基外还有重叠片段，所以导致扩出的片段少了一段，只是推测，赶快测序吧，又快又便宜。

好的，非常感谢

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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5楼2015-04-21 10:11:15
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mazhenggen

铁虫 (正式写手)
可能是上下游的引物特异性不好导致

[ 发自小木虫客户端 ]
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我喜欢所以我做
6楼2015-04-24 12:53:49
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chenleihefei

新虫 (小有名气)
楼主问一下你的引物怎么设计的啊？
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我就是我！
7楼2015-12-23 09:11:06
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