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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » DGGE梯度凝胶电泳后，有的条带特别亮，有的条带特别暗，该怎么调
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蓝色的心情79

新虫 (初入文坛)

[求助] DGGE梯度凝胶电泳后，有的条带特别亮，有的条带特别暗，该怎么调 已有1人参与

我做的尖镰孢菌的DGGE, 跑胶后出现的条带有的特别亮，有的特别暗，我改怎么调
PCR反应体系 50ul
MIX   25ul
模板  3ul
引物 1*2 ul
水  20 ul
反映程序
94度  7min
94度  1min
67度  45 s
72度  1min
72度  15min
4 度。。。。
一共是35循环
哪位高人指点一下
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    • 2015-04-06 11:36:24, 4.11 M

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1楼 2015-04-06 11:41:55
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liugs

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
4楼2015-04-10 09:10:02
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liugs

禁虫 (正式写手)
感谢参与，应助指数 +1
本帖内容被屏蔽
2楼2015-04-09 08:40:42
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蓝色的心情79

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by liugs at 2015-04-09 08:40:42
其实不用调，条带的亮和暗反应的是菌的数量的差异，如果条带的亮度都一致反而有问题了！

条带特别暗的用软件分析不出来，而且条带特别亮的带很宽，应该是没P出来，不知道应该怎么改进了，请问你有什么建议吗
赞一下 回复此楼
3楼2015-04-09 10:25:40
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