24小时热门版块排行榜    

查看: 2316  |  回复: 8

doubleping

新虫 (小有名气)

[求助] bio-rad DGGE漏胶问题

DGGE实验真是虐心啊,刚解决一个问题就出现了另一个问题
我实验室用的是伯乐7L的DGGE仪器,仪器是新买的。之前制胶都很正常,不怎么会漏胶,漏的话也是梳子的须须漏掉一些,最近制胶发现漏胶很严重,基本上已经没有梳孔了,但是每次拔梳子之前,看过去都很正常,拔完之后才知道原来须须的地方都是液体,梳子一拔就全部流下去了,于是梳孔也不见了。
我也尝试在制胶前先在玻璃的三边用0%的变性剂封住,但是没有用,第二天还是没有梳孔,不知道是什么原因?
我自己猜想可能是变性剂灌胶后体积变小了,但是如果是这个原因应该怎么解决?因为我之前配的变性剂和现在都是一样的,之前没发生过这种现象
请各位帮我一起分析分析
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

环境微生物

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wuyao0513

新虫 (小有名气)

洗干净,还有看看制胶的缓冲液有没有变化。。
2楼2013-10-16 23:10:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

doubleping

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wuyao0513 at 2013-10-16 23:10:56
洗干净,还有看看制胶的缓冲液有没有变化。。

洗干净是指玻璃吧,我都是洗干净制胶前再用酒精擦干净。您说的制胶缓冲液指的是变性剂吗?没有发现有什么变化

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
3楼2013-10-16 23:29:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

瓜尔佳氏鱼鱼

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2013-10-17 09:12:36
doubleping: 金币+8, ★★★★★最佳答案 2013-10-20 09:31:57
你是不是制剂的时候把硫酸铵溶液和TEMD的剂量放反了啊???我之前也出现过这个情况,别的地方都宁的好好的,就是梳子那不凝,结果是两个试剂的量方法了,这个问题应该和清洁度没有关系吧,我做实验是的时候没有用酒精擦过,但是胶凝的好好的。然后你看看你的硫酸铵溶液是不是现用现制的,这个得零下20度保藏,且有效期是7天。
过上等人的生活,尽中等人的劳力,享下等人的情欲。
4楼2013-10-17 09:09:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

doubleping

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 瓜尔佳氏鱼鱼 at 2013-10-17 09:09:49
你是不是制剂的时候把硫酸铵溶液和TEMD的剂量放反了啊???我之前也出现过这个情况,别的地方都宁的好好的,就是梳子那不凝,结果是两个试剂的量方法了,这个问题应该和清洁度没有关系吧,我做实验是的时候没有用酒 ...

硫酸铵实现配现用的,20ml变性剂80ulAPS,10ultemde,这个剂量没错吧,但是就是出现了这个情况
5楼2013-10-17 18:29:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

瓜尔佳氏鱼鱼

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-10-18 02:28:23
我做的时候是20ml变性溶液对应180ul,你用的太少了,所以会出现这种情况,考虑加大过硫酸铵溶液的量。对了是过硫酸铵哦,我长时间不做忘记了,10% 的过硫酸铵!!!我做的时候是180ul,百分之十的过硫酸铵,18ulTMED对应20ml的变性溶液,你试试看。
过上等人的生活,尽中等人的劳力,享下等人的情欲。
6楼2013-10-17 21:22:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

doubleping

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 瓜尔佳氏鱼鱼 at 2013-10-17 21:22:43
我做的时候是20ml变性溶液对应180ul,你用的太少了,所以会出现这种情况,考虑加大过硫酸铵溶液的量。对了是过硫酸铵哦,我长时间不做忘记了,10% 的过硫酸铵!!!我做的时候是180ul,百分之十的过硫酸铵,18ulTME ...

谢谢你,我改成120的APS和12的TEMED,效果已经改善了很多
7楼2013-10-20 09:31:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

瓜尔佳氏鱼鱼

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by doubleping at 2013-10-20 09:31:41
谢谢你,我改成120的APS和12的TEMED,效果已经改善了很多...

那就好,祝实验成功!
过上等人的生活,尽中等人的劳力,享下等人的情欲。
8楼2013-10-22 18:08:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

beikeyang

新虫 (初入文坛)

请问一下,为什么用0%的胶封底呢?有什么作用吗?
9楼2015-04-01 09:53:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 doubleping 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 327求调剂 +6 拾光任染 2026-03-15 11/550 2026-03-15 22:47 by 拾光任染
[考研] 梁成伟老师课题组欢迎你的加入 +6 一鸭鸭哟 2026-03-14 7/350 2026-03-15 22:12 by Winj1e
[考博] 东华理工大学化材专业26届硕士博士申请 +6 zlingli 2026-03-13 6/300 2026-03-15 20:00 by ryzcf
[考研] 中科大材料与化工319求调剂 +3 孟鑫材料 2026-03-14 3/150 2026-03-14 20:10 by ms629
[考研] 求调剂! +4 朔朔话 2026-03-09 4/200 2026-03-14 01:38 by JourneyLucky
[考研] 调剂 +3 13853210211 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:47 by JourneyLucky
[考研] 材料工程专硕,一志愿中国矿业大学,总分314,求调剂 +5 无懈可击的巨人 2026-03-10 5/250 2026-03-14 00:37 by JourneyLucky
[考研] 材料工程,326分,求调剂 +6 KRSLSR 2026-03-10 6/300 2026-03-13 23:47 by JourneyLucky
[考研] 求调剂(材料与化工327) +4 爱吃香菜啦 2026-03-11 4/200 2026-03-13 22:11 by JourneyLucky
[考研] 085600调剂 +5 漾漾123sun 2026-03-12 5/250 2026-03-13 22:06 by 星空星月
[考研] 材料工程调剂 +9 咪咪空空 2026-03-12 9/450 2026-03-13 22:05 by 星空星月
[考研] (081700)化学工程与技术-298分求调剂 +12 11啦啦啦 2026-03-11 35/1750 2026-03-13 21:25 by JourneyLucky
[硕博家园] 085600 260分求调剂 +3 天空还下雨么 2026-03-13 5/250 2026-03-13 18:46 by 天空还下雨么
[考研] 085600材料与化工 309分请求调剂 +7 dtdxzxx 2026-03-12 8/400 2026-03-13 14:43 by jxchenghu
[考博] 26读博 +4 Rui135246 2026-03-12 10/500 2026-03-13 07:15 by gaobiao
[考研] 一志愿河海大学085900土木水利专硕279求调剂不挑专业 +4 SunWwWwWw 2026-03-10 8/400 2026-03-13 02:23 by SunWwWwWw
[考研] 341求调剂 +4 捣蛋猪猪 2026-03-11 4/200 2026-03-12 14:47 by ruiyingmiao
[考研] 290求调剂 +3 柯淮然 2026-03-10 8/400 2026-03-11 13:48 by 柯淮然
[基金申请] 提交后的基金本子,已让学校撤回了,可否换口子提交 +3 dut_pfx 2026-03-10 3/150 2026-03-11 08:38 by kudofaye
[考研] 化工0817调剂 +8 灿若星晨 2026-03-10 8/400 2026-03-10 22:44 by 星空星月
信息提示
请填处理意见