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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » DGGE 灌胶 胶的浓度 分离度
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mandywang

铁虫 (正式写手)

[求助] DGGE 灌胶 胶的浓度 分离度

条件 160v 390min，30%——60%，第一张图8%的胶。第二张 10%
片段450左右
为什么我第一张图有一块弧线，最近做了好几张图都是这种，我已经放慢灌胶的速度了？我前几天做的也不这样呀

第二张就相对好一点，可是大家看看条带是不没分开，怎么改善一下
还有看大家的帖子都说片段〉300bp就6%的胶，这个胶的浓度到底如何确定，与什么有关呢

第三张也弯条件 同第一张 。怎么就各种弯呢，再弯下去，我就哭了，谢谢大家
DGGE 灌胶 胶的浓度 分离度
11.JPG


DGGE 灌胶 胶的浓度 分离度-1
22.JPG


DGGE 灌胶 胶的浓度 分离度-2
33.JPG
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inging
1楼 2013-05-30 00:12:09
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阿四=阿瑟

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
mandywang: 金币+5 2013-05-31 12:01:09
会不会是电压的问题呢？
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mandywang
为梦想而奋斗
2楼2013-05-30 20:32:50
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mandywang

铁虫 (正式写手)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 阿四=阿瑟 at 2013-05-30 20:32:50
会不会是电压的问题呢？

你是说电压不稳定吗
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inging
3楼2013-05-31 12:00:49
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双双WC

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助！ 2013-06-04 19:57:45
mandywang: 金币+10, ★★★很有帮助 2013-06-04 23:03:17
电压小点，一般进入分离胶后我用100-120V跑，时间大概12h左右。
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4楼2013-06-04 11:09:45
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mandywang

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 双双WC at 2013-06-04 11:09:45
电压小点，一般进入分离胶后我用100-120V跑，时间大概12h左右。

麻烦问一下什么叫进入分离胶呢，是说先用大点电压跑一段时间再换小电压吗，可以说一下你的具体设置吗，
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inging
5楼2013-06-04 23:03:03
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双双WC

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
mandywang: 金币+5, ★有帮助 2013-06-06 20:25:01
引用回帖:
5楼: Originally posted by mandywang at 2013-06-04 23:03:03
麻烦问一下什么叫进入分离胶呢，是说先用大点电压跑一段时间再换小电压吗，可以说一下你的具体设置吗，...

对，上面是上样胶，下面是分离胶。我们一般是120V跑15分钟，等含有样品的蓝色跑到下面分离胶时，100V跑大概13个小时，具体时间看自己片段大小定
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6楼2013-06-05 00:49:43
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mandywang

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 双双WC at 2013-06-05 00:49:43
对，上面是上样胶，下面是分离胶。我们一般是120V跑15分钟，等含有样品的蓝色跑到下面分离胶时，100V跑大概13个小时，具体时间看自己片段大小定...

哦，谢谢亲
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inging
7楼2013-06-06 20:24:54
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zhang226296

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 双双WC at 2013-06-05 00:49:43
对，上面是上样胶，下面是分离胶。我们一般是120V跑15分钟，等含有样品的蓝色跑到下面分离胶时，100V跑大概13个小时，具体时间看自己片段大小定...

求救啊，我做了很久的DGGE了，就是不出结果，8%，50-70%的胶条带全集中在下半部分，上半部分一条都没有，其他的比如40-60%，45-60%，50-65%就跟糟糕，就有几条带，上部还是没有，快崩溃了，有个同学几天就做出来了，求高手赐教啊
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8楼2014-03-21 18:49:21
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