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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 提rna用的depc水（康润公司试剂盒）可以用来稀释引物吗
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lansheng630

新虫 (初入文坛)

[求助] 提rna用的depc水（康润公司试剂盒）可以用来稀释引物吗 已有2人参与

做pcr一个星期了，用depc水稀释的引物pcr不出来产物，用灭菌过的去离子水就可以p出来，想问是不是水的问题？退火温度和延伸时间都做了梯度，也做不出来。

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1楼 2015-04-04 16:53:17
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dandancau

新虫 (小有名气)
可以。

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2楼2015-04-04 18:52:52
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-04-07 22:57:17
那个水里大概有0.1%的乙醇，不过这么少的乙醇应该不会有什么影响
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The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
3楼2015-04-05 02:31:04
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602059625

金虫 (知名作家)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-04-07 22:57:39
1个DEPC在水中分解成2个二氧化碳和2个乙醇
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[url=http://ip.WoTuLa.com][img]http://i.WoTuLa.com/note.png?name=填写姓名&say=这里填写您想说的内容。[/img][/url]
4楼2015-04-05 12:06:05
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lansheng630

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2015-04-05 02:31:04
那个水里大概有0.1%的乙醇，不过这么少的乙醇应该不会有什么影响

试剂盒里的depc水是高压灭菌过的吗？是否有毒性？

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5楼2015-04-05 12:16:15
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卡维斯

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
lansheng630: 金币+5, ★★★★★最佳答案, 很详细，谢谢 2015-04-06 21:40:03
试剂盒里面RNase-free 的水大多是DEPC处理的，而虽然经过灭菌但是其中还是含有相应灭活RNase类的成分，用其稀释引物来做PCR，会对你的Taq酶活性有或多或少的影响，如果只是鉴定基因组一类可以勉强使用，但是长期而言浪费各种材料和时间。建议选用单独灭菌后的ddH2O稀释引物。
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6楼2015-04-06 11:03:07
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