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bnusysj

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[求助] DNA引物用什么溶解

最近小弟有点迷惑，DNA引物该用什么溶解。刚开始的时候，用TE，但后来发现TE对酶的活性有很大影响，所以想改用Tris，但又不知道Tris在-20℃的pH会是多少。担心会不会由于温度的剧烈变化，在室温时pH=7.4的Tris在低温时的pH会有比较大的变化呢？请各位同道中人指教。

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1楼 2012-12-14 10:12:19

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回帖置顶 ( 共有1个 )

gyesang

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【答案】应助回帖

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1949stone: 回帖置顶 2012-12-14 14:37:08
1949stone: MolEPI+1, 好说加您为专家呢原来都是斑竹了就差一天老大同意了 2012-12-14 14:37:49

引物稀释及保存
1．干粉引物溶解
收到引物后，在开启离心管盖前先在3000-4000转/分钟的转速下离心1分钟，以防开盖时引物干粉散失(因为引物包装时，一般是负压)。引物保存在高浓度的状况下比较稳定(请参考生化书，DNA溶解曲线那一章节)。如果对实验的重复性要求较高，合成的OD数较大，可以分装，避免反复冻融。引物一般配制成母液100uM保存，再稀释成10uM的工作浓度。稀释时只需用无核酸酶的双蒸水将引物干粉溶解即可。

2. 引物保存
◆干燥制品很稳定，常温下数个月无问题。但为保证万无一失，最好放置于- 20 ℃保存；
◆溶解后的溶液DNA短期内(1～2 周)使用可放置在4 ℃下，长期保存请放置于- 20 ℃；
◆如果对实验的重复性要求较高，合成的OD数较大，建议分装，避免反复冻融；
◆荧光标记引物请避光保存。