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墨尔本机器

金虫 (小有名气)

[交流] wb需要重复实验吗 已有5人参与

小白求助,WB实验如何设置生物学重复?难道跑一次结果ok就可以了吗?
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲,勿施于人


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
需要重复
而且要完全独立重复,不要用同一管蛋白来做跑两个WB
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
2楼2015-03-16 22:42:44
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲,勿施于人


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by 墨尔本机器 at 2015-03-16 13:00:02
那文章里图不是只能放一张吗?...

文章图当然只能放一张,但是你如果要证明某个条带的亮度上升,下降或者没有变化总要进行t-test分析。没有重复就不能得出结论。
如果你要对条带亮度进行定量,那定量也需要误差值
极少数情况可能重复是没有必要的,比如你转染了一个蛋白,只是想看看转染效率,结果发现转染后浓度升高了100多倍。
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
4楼2015-03-17 23:58:57
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lavender_li

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
当然要重复验证。至少3次以上才可以数据分析。
每次提出来蛋白质样品都多少会有不同,但是蛋白质表达的变化都得到同样的结果才可以说有变化
5楼2015-03-18 09:34:09
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lavender_li

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
8楼: Originally posted by 墨尔本机器 at 2015-03-18 14:51:58
如果进行ttest是不是要进行灰度分析,做柱状图?
我只做wb看明显的条带变化,是不是也可以直接下结论,在实验图后面标一下重复了几次就可以了?...

如果不用分析ttest做柱状图的话,不分析数据就好。
但是只做一次WB,条带有明显变化,你不能确定这变化是客观存在的,还是实验操作误差造成的。
同样的操作方法,也许第二次就得不出来相同的实验结果了。最好重复两三次以上,这样得出来的数据才有可信性
9楼2015-03-18 18:07:50
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lidong.0107

铜虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
要做三次生物重复,三次技术重复
11楼2015-03-19 11:03:24
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普通回帖

墨尔本机器

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2015-03-16 22:42:44
需要重复
而且要完全独立重复,不要用同一管蛋白来做跑两个WB

那文章里图不是只能放一张吗?
3楼2015-03-17 09:00:02
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汉一十三

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
肯定要重复呀,重复提蛋白,重复做,要确定提的蛋白总量是一样的,在就是确定该表达的表达了,重复做几次都是这个结果,实验就成功了
6楼2015-03-18 14:40:12
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墨尔本机器

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2015-03-17 23:58:57
文章图当然只能放一张,但是你如果要证明某个条带的亮度上升,下降或者没有变化总要进行t-test分析。没有重复就不能得出结论。
如果你要对条带亮度进行定量,那定量也需要误差值
极少数情况可能重复是没有必要的 ...

如果进行ttest是不是要进行灰度分析,做柱状图?
我只做wb看明显的条带变化,是不是也可以直接下结论,在实验图后面标一下重复了几次就可以了?
7楼2015-03-18 14:50:42
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墨尔本机器

金虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by lavender_li at 2015-03-18 09:34:09
当然要重复验证。至少3次以上才可以数据分析。
每次提出来蛋白质样品都多少会有不同,但是蛋白质表达的变化都得到同样的结果才可以说有变化

如果进行ttest是不是要进行灰度分析,做柱状图?
我只做wb看明显的条带变化,是不是也可以直接下结论,在实验图后面标一下重复了几次就可以了?
8楼2015-03-18 14:51:58
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墨尔本机器

金虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by lavender_li at 2015-03-18 18:07:50
如果不用分析ttest做柱状图的话,不分析数据就好。
但是只做一次WB,条带有明显变化,你不能确定这变化是客观存在的,还是实验操作误差造成的。
同样的操作方法,也许第二次就得不出来相同的实验结果了。最好重复 ...

谢谢
10楼2015-03-18 19:38:02
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