[交流] wb需要重复实验吗已有5人参与

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1楼2015-03-16 20:27:07

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fuyuandj86

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需要重复
而且要完全独立重复，不要用同一管蛋白来做跑两个WB

The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.

2楼2015-03-16 22:42:44

fuyuandj86

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3楼: Originally posted by 墨尔本机器 at 2015-03-16 13:00:02
那文章里图不是只能放一张吗？...

文章图当然只能放一张，但是你如果要证明某个条带的亮度上升，下降或者没有变化总要进行t-test分析。没有重复就不能得出结论。
如果你要对条带亮度进行定量，那定量也需要误差值
极少数情况可能重复是没有必要的，比如你转染了一个蛋白，只是想看看转染效率，结果发现转染后浓度升高了100多倍。

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4楼2015-03-17 23:58:57

lavender_li

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当然要重复验证。至少3次以上才可以数据分析。
每次提出来蛋白质样品都多少会有不同，但是蛋白质表达的变化都得到同样的结果才可以说有变化

5楼2015-03-18 09:34:09

lavender_li

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8楼: Originally posted by 墨尔本机器 at 2015-03-18 14:51:58
如果进行ttest是不是要进行灰度分析，做柱状图？
我只做wb看明显的条带变化，是不是也可以直接下结论，在实验图后面标一下重复了几次就可以了？...

如果不用分析ttest做柱状图的话，不分析数据就好。
但是只做一次WB，条带有明显变化，你不能确定这变化是客观存在的，还是实验操作误差造成的。
同样的操作方法，也许第二次就得不出来相同的实验结果了。最好重复两三次以上，这样得出来的数据才有可信性

9楼2015-03-18 18:07:50

lidong.0107

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要做三次生物重复，三次技术重复

11楼2015-03-19 11:03:24

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墨尔本机器

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2楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2015-03-16 22:42:44
需要重复
而且要完全独立重复，不要用同一管蛋白来做跑两个WB

那文章里图不是只能放一张吗？

3楼2015-03-17 09:00:02

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肯定要重复呀，重复提蛋白，重复做，要确定提的蛋白总量是一样的，在就是确定该表达的表达了，重复做几次都是这个结果，实验就成功了

6楼2015-03-18 14:40:12

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4楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2015-03-17 23:58:57
文章图当然只能放一张，但是你如果要证明某个条带的亮度上升，下降或者没有变化总要进行t-test分析。没有重复就不能得出结论。
如果你要对条带亮度进行定量，那定量也需要误差值
极少数情况可能重复是没有必要的 ...

如果进行ttest是不是要进行灰度分析，做柱状图？
我只做wb看明显的条带变化，是不是也可以直接下结论，在实验图后面标一下重复了几次就可以了？

7楼2015-03-18 14:50:42

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5楼: Originally posted by lavender_li at 2015-03-18 09:34:09
当然要重复验证。至少3次以上才可以数据分析。
每次提出来蛋白质样品都多少会有不同，但是蛋白质表达的变化都得到同样的结果才可以说有变化

如果进行ttest是不是要进行灰度分析，做柱状图？
我只做wb看明显的条带变化，是不是也可以直接下结论，在实验图后面标一下重复了几次就可以了？

8楼2015-03-18 14:51:58

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9楼: Originally posted by lavender_li at 2015-03-18 18:07:50
如果不用分析ttest做柱状图的话，不分析数据就好。
但是只做一次WB，条带有明显变化，你不能确定这变化是客观存在的，还是实验操作误差造成的。
同样的操作方法，也许第二次就得不出来相同的实验结果了。最好重复 ...

谢谢

10楼2015-03-18 19:38:02