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郭浩sli

新虫 (小有名气)

[求助] SDS-PAGE 丙烯酰胺凝胶电泳,加样后逐渐上漂原因,求指导 已有5人参与

Marker和样品都是用样品缓冲液(自己配制)配制后加热处理的,然后用微量进样器注射入泳道内,刚注射完后样品汇聚在泳道底部,然后即开始逐渐沿着泳道的两侧上升。如图所示。请各位大神指点!

SDS-PAGE 丙烯酰胺凝胶电泳,加样后逐渐上漂原因,求指导
IMG_20150130_104156.jpg
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郭浩sli

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by ptttmt at 2015-01-30 20:13:49
上样缓冲液没加甘油??电极反了??

谢谢!缓冲液中加甘油了,电极没反,当时没通电。我也在担心是甘油的问题,买的是500Ml 12元包装的,不知道影响大不?
3楼2015-01-30 20:16:06
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查看全部 19 个回答

ptttmt

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
郭浩sli: 金币+5, ★有帮助 2015-01-31 13:25:51
上样缓冲液没加甘油??电极反了??

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2015-01-30 20:13:49
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飞约疯人院

专家顾问 (著名写手)

科学怪人

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
郭浩sli(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励回帖交流 2015-01-30 22:34:47
郭浩sli: 金币+25, ★★★★★最佳答案 2015-01-31 13:26:47
1 缓冲液问题,可能时间过长或有污染以及是否加入甘油
2 电源正负极是否正确
3 胶孔没洗干净,里面有碎胶
4 上样孔有气泡
5 loading buffer浓度低或者样品浓度低,导致样品没有被loading buffer 沉下来
人生贵在行动,迟疑不决时,不妨先迈出小小一步。
4楼2015-01-30 20:22:09
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郭浩sli

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 飞约疯人院 at 2015-01-30 20:22:09
1 缓冲液问题,可能时间过长或有污染以及是否加入甘油
2 电源正负极是否正确
3 胶孔没洗干净,里面有碎胶
4 上样孔有气泡
5 loading buffer浓度低或者样品浓度低,导致样品没有被loading buffer 沉下来

专家!前两个问题应该可以排除了。第三个问题,确实没洗胶孔,因为半年前做的时候也没有洗,当时没影响,加上问了另外两个课题组做的时候也都没洗。第四个问题,没有观察到有气泡。另外,如果是3、4两条的原因的话,出现所有泳道都上漂的可能性应该不大吧?关于第五个问题,我觉得更可能会引起所有泳道的异常,但我不太明白这个loading buffer具体指的是什么,请您赐教!
5楼2015-01-30 20:43:06
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