24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
汕头大学海洋科学接受调剂
查看: 1704  |  回复: 3
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

月落星沉

银虫 (初入文坛)

[求助] 如何判断大肠杆菌有没有被污染? 已有3人参与

老板叫我拿大肠杆菌做葡萄糖降解的实验,从别人那里拿来了一株E.coli,先用LB活化培养了2次,闻到了大肠杆菌常有的那种臭臭的味道。
然后清洗菌体3次后转接到以葡萄糖为唯一碳源的培养基中,长得比较慢,臭味也比较淡,但从第二天开始肉眼能看见浑浊但菌体浓度不是很大,后面在摇床上放了3天,菌体浓度没有很明显的变化。

我不确定这株大肠杆菌是不是真的能以葡糖为唯一碳源生长,就把菌体又清洗了3次转接到以葡萄糖为唯一碳源的培养基中,这次开始2天菌体基本没有生长(OD600从0.07升到0.08),我一着急就中途向培养基中添加了一次葡萄糖,一天半后OD600变为1.8,但我没有闻到大肠杆菌那种特有的气味,而有一种淡淡的酸味,不知道这一系列操作过程中是不是被污染了。

有没有什么快速简单的方法能判断有没有被污染?RNA测序对我来说不大现实。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

沙暴我爱罗0

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我认为你可以将你的菌种在平板上养一养,长起来后提DNA,P出16SrDNA,然后测序。根据序列吸收峰图谱就可以看出到底污染了没有。
我平时是这样来检测我的东西有没污染的。嘿嘿。。。。多指教。
nopainsnogains
3楼2015-02-03 01:05:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 4 个回答

wlw1002

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励应助! 2015-01-31 20:44:18
月落星沉: 金币+20, 有帮助 2015-02-03 16:13:38
把你的培养物在固体平板上划线分离,革兰氏染色,镜检,与原菌种对比,能够大致判断出来是否污染。
2楼2015-01-30 14:44:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ccdbaobao

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

将菌液做10倍梯度稀释,然后涂个板不就知道了么,染菌的话长出的菌落形态会不一样的。而且根据你的描述菌液有酸味,有可能是葡萄糖被发酵成乳酸了,如果真是这样那就是污染了产乳酸的细菌,可以将菌液在MRS平板上涂板,看是否能分离的出乳酸菌。如果平板上长出的菌落肉眼实在不好区分,还是建议PCR扩增一下16sDNA,送测。
4楼2015-02-03 11:32:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085600材料与化工329分求调剂 +19 叶zilin 2026-04-13 20/1000 2026-04-14 00:23 by 福农资环_环境基
[考研] 327求调剂 +21 Xxjc1107. 2026-04-13 23/1150 2026-04-13 21:53 by bljnqdcc
[考研] 求调剂 +11 何气正 2026-04-13 12/600 2026-04-13 20:14 by 学员JpLReM
[考研] 273求调剂 +3 白居不易. 2026-04-09 5/250 2026-04-13 19:27 by or7ro
[基金申请] 2026 WR青拔 +3 liuchb715 2026-04-09 6/300 2026-04-13 18:40 by liuchb715
[教师之家] 山东双非院校考核超级无底线,领导幸灾乐祸,教师遭殃恐 +3 qut2026 2026-04-11 7/350 2026-04-12 20:24 by qut2026
[考研] 085410 273求调剂 +10 X1999 2026-04-09 10/500 2026-04-12 09:24 by 逆水乘风
[考研] 一志愿郑州大学 22408 305分求调剂 +5 安小满zzz 2026-04-08 5/250 2026-04-12 00:41 by 蓝云思雨
[考研] 291分调剂 +5 上岸小莹加油 2026-04-09 6/300 2026-04-11 21:06 by 逆水乘风
[考研] 270求调剂 +14 杨乐369 2026-04-11 14/700 2026-04-11 20:16 by 蓝云思雨
[考研] 359求调剂 +5 胃痉挛累了 2026-04-11 5/250 2026-04-11 19:55 by lbsjt
[考研] 298求调剂 +5 残荷新柳 2026-04-07 5/250 2026-04-11 11:02 by 紫曦紫棋
[考研] 085402通信工程调剂,有4项学科竞赛国奖(电赛国二),硕士研究生调剂自荐信。 +5 m永o不v言o弃m 2026-04-09 5/250 2026-04-11 09:33 by zhq0425
[考研] 263能源动力专硕求调剂 +3 加大号饭盒袋 2026-04-10 3/150 2026-04-10 22:23 by 286640313
[考研] 本科西工大 0856 324求调剂 +10 wysyjs25 2026-04-09 11/550 2026-04-10 08:37 by 5268321
[考研] 085400电子信息类(川大控制工程)求调剂可跨专业 求老师联系 +3 626776879 2026-04-08 3/150 2026-04-09 16:05 by 猪会飞
[考研] 调剂 +12 月@163.com 2026-04-08 12/600 2026-04-09 14:27 by rl1980
[考研] 085801 总分275 本科新能源 求调剂 +8 bradoner 2026-04-08 9/450 2026-04-09 13:43 by only周
[考研] 求调剂 +3 猪肉墩粉条cc 2026-04-08 4/200 2026-04-09 10:05 by 猪肉墩粉条cc
[考研] 求调剂 +13 柒luck 2026-04-07 13/650 2026-04-08 22:46 by 猪会飞
信息提示
请填处理意见