24小时热门版块排行榜    

查看: 1666  |  回复: 3
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

月落星沉

银虫 (初入文坛)

[求助] 如何判断大肠杆菌有没有被污染? 已有3人参与

老板叫我拿大肠杆菌做葡萄糖降解的实验,从别人那里拿来了一株E.coli,先用LB活化培养了2次,闻到了大肠杆菌常有的那种臭臭的味道。
然后清洗菌体3次后转接到以葡萄糖为唯一碳源的培养基中,长得比较慢,臭味也比较淡,但从第二天开始肉眼能看见浑浊但菌体浓度不是很大,后面在摇床上放了3天,菌体浓度没有很明显的变化。

我不确定这株大肠杆菌是不是真的能以葡糖为唯一碳源生长,就把菌体又清洗了3次转接到以葡萄糖为唯一碳源的培养基中,这次开始2天菌体基本没有生长(OD600从0.07升到0.08),我一着急就中途向培养基中添加了一次葡萄糖,一天半后OD600变为1.8,但我没有闻到大肠杆菌那种特有的气味,而有一种淡淡的酸味,不知道这一系列操作过程中是不是被污染了。

有没有什么快速简单的方法能判断有没有被污染?RNA测序对我来说不大现实。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

沙暴我爱罗0

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我认为你可以将你的菌种在平板上养一养,长起来后提DNA,P出16SrDNA,然后测序。根据序列吸收峰图谱就可以看出到底污染了没有。
我平时是这样来检测我的东西有没污染的。嘿嘿。。。。多指教。
nopainsnogains
3楼2015-02-03 01:05:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 4 个回答

wlw1002

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励应助! 2015-01-31 20:44:18
月落星沉: 金币+20, 有帮助 2015-02-03 16:13:38
把你的培养物在固体平板上划线分离,革兰氏染色,镜检,与原菌种对比,能够大致判断出来是否污染。
2楼2015-01-30 14:44:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ccdbaobao

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

将菌液做10倍梯度稀释,然后涂个板不就知道了么,染菌的话长出的菌落形态会不一样的。而且根据你的描述菌液有酸味,有可能是葡萄糖被发酵成乳酸了,如果真是这样那就是污染了产乳酸的细菌,可以将菌液在MRS平板上涂板,看是否能分离的出乳酸菌。如果平板上长出的菌落肉眼实在不好区分,还是建议PCR扩增一下16sDNA,送测。
4楼2015-02-03 11:32:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 293求调剂 +3 加一一九 2026-03-24 3/150 2026-03-24 10:31 by 544594351
[考研] 0854 考研调剂 招生了!AI 方向 +4 pk3725069 2026-03-19 16/800 2026-03-23 23:09 by 汪!?!
[考研] 317求调剂 +12 申子申申 2026-03-19 18/900 2026-03-22 22:23 by luoyongfeng
[考研] 0854电子信息求调剂 +3 α____ 2026-03-22 3/150 2026-03-22 21:28 by zhq0425
[考研] 一志愿北京化工大学070300 学硕336求调剂 +5 vv迷 2026-03-21 8/400 2026-03-22 14:20 by ColorlessPI
[考研] 初试 317 +7 半拉月丙 2026-03-20 7/350 2026-03-21 22:26 by peike
[考研] 化学调剂 +5 yzysaa 2026-03-21 5/250 2026-03-21 22:12 by peike
[考研] 材料与化工(0856)304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-20 7/350 2026-03-21 19:05 by 15709483992
[考研] 材料与化工(0856)304求 B区 调剂 +3 邱gl 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:47 by lature00
[考研] 一志愿武理材料305分求调剂 +6 想上岸的鲤鱼 2026-03-18 7/350 2026-03-21 01:03 by JourneyLucky
[考研] 304求调剂 +6 曼殊2266 2026-03-18 6/300 2026-03-21 00:32 by JourneyLucky
[考研] 南京大学化学376求调剂 +3 hisfailed 2026-03-19 6/300 2026-03-20 23:43 by hisfailed
[考研] 321求调剂 +9 何润采123 2026-03-18 11/550 2026-03-20 23:19 by JourneyLucky
[考研] 一志愿中海洋材料工程专硕330分求调剂 +8 小材化本科 2026-03-18 8/400 2026-03-20 23:16 by JourneyLucky
[考研] 一志愿南理工085701环境302求调剂院校 +3 葵梓卫队 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:28 by zhukairuo
[考研] 086500 325 求调剂 +3 领带小熊 2026-03-19 3/150 2026-03-20 18:38 by 尽舜尧1
[考研] 0703化学调剂 +5 pupcoco 2026-03-17 8/400 2026-03-19 13:58 by houyaoxu
[考研] 材料工程专硕调剂 +5 204818@lcx 2026-03-17 6/300 2026-03-18 22:55 by 204818@lcx
[考研] 0703化学调剂 +3 妮妮ninicgb 2026-03-17 3/150 2026-03-18 10:29 by macy2011
[考博] 26博士申请 +3 1042136743 2026-03-17 3/150 2026-03-17 23:30 by 轻松不少随
信息提示
请填处理意见